内容正文:
第2章 组成细胞的分子
第1节 细胞中的元素和化合物
第二课时
检测生物组织中的糖类、脂肪
和蛋白质
1.还原糖的鉴定
③实验原理:
还原糖 + 斐林试剂 砖红色沉淀
水浴加热
①还原性糖与非还原性糖:
还原性糖: 葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖。
非还原性糖:淀粉、纤维素、蔗糖、糖原。
②实验试剂:斐林试剂
甲液:质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液
乙液:质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液
现用现配,等量混匀
三、实验:检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质
选材:还原糖含量高的白色或近于白色的植物组织 (排除色素的干扰)
取组织样液:苹果汁、梨匀浆或白萝卜匀浆2mL
显色反应
现象与结论:
50~65℃水浴
加热约2min
④实验步骤:
2mL组织样液
1mL斐林试剂
(甲液和乙液等量混合均匀后再注入)
呈现蓝色
砖红色沉淀
①实验试剂:苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ
②实验原理:
脂肪 + 苏丹Ⅲ→橘黄色 脂肪 + 苏丹Ⅳ→红色
③实验材料:花生种子或花生种子匀浆
④实验步骤:
方法一:向待测组织样液中滴加3滴苏丹Ⅲ染液,观察样液被染色情况。
方法二:制作子叶临时切片,用显微镜观察子叶细胞的着色情况。
(取材,切片,制片,观察)
三、实验:检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质
2.脂肪的鉴定
2.脂肪的鉴定
取材和切片:花生种子(实验前浸泡),去皮,将子叶削成薄片
制片:
①选取最薄的薄片移至载玻片中央
②染色:在薄片上滴2-3滴苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)染液,染色3min
③去浮色:滴加体积分数为50%的酒精溶液1—2滴,洗去浮色(多余染液)
④吸去余液,滴1-2滴蒸馏水,盖上盖玻片,制成临时装片
显微观察与现象:
先在低倍镜下找到已着色的薄片,后用高倍镜观察,可看见染色的脂肪颗粒
三、实验:检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质
①实验原理:
蛋白质 + 双缩脲试剂→紫色
②实验材料:豆浆、鸡蛋蛋白
③试剂:双缩脲试剂 (先A液,后B液)
A液:质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液
B液:质量浓度为0.01g/mL的CuSO4溶液
三、实验:检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质
3.蛋白质的鉴定
3.蛋白质的鉴定
选材:
黄豆组织样液(豆浆)、鲜肝提取液或鸡蛋清稀释液
显色反应:
现象与结论:
无色
紫色
(创设碱性条件)
(提供Cu2+)
制备组织样液:
2mL组织液
先加1mL双缩脲试剂A液
震荡摇匀
后加4滴双缩脲试剂B液(不能过量)
三、实验:检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质
①实验原理:淀粉 + 碘→蓝色
②实验材料:马铃薯匀浆
③试剂:碘液
④实验步骤
①向试管内注入2mL待测组织样液。
②向试管内滴加两滴碘液,观察颜色变化
实验现象(如右图)
三、实验:检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质
4.淀粉的鉴定
比较项目 试剂及成分 原理 溶液浓度 方法 加热与否 结果
可溶还原糖的鉴定 斐林试剂NaOH和CuSO4 砖红色沉淀
蛋白质的鉴定 双缩脲试剂NaOH和CuSO4 溶液呈紫色
4、斐林试剂与双缩脲试剂两者有何不同?
新配制的
Cu(OH)2
溶液
在碱性
环境下
的Cu2+
NaOH浓度为
0.1g/mL
CuS04浓度为0.05g/mL
NaOH浓度为0.1g/mL
CuS04浓度0.01g/mL
先把NaOH溶液和
CuSO4溶液混合,
而后立即使用。
先加入Na0H1mL,再加CuS044滴,摇匀。
(不能过量)
水浴
加热
不需要
3.实验注意问题
(1)实验材料的选择
①还原糖的鉴定实验中,最理想的实验材料是含糖量较高的生物组织(或器官),而且组织的颜色较浅,易于观察。可选用苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等,但不能选用甜菜、甘蔗,因为它们所含的蔗糖是一种非还原糖;马铃薯因含淀粉较多也不能做实验材料;不能选西瓜、血液(含葡萄糖)、含还原糖的绿色叶片等做实验材料,以避免颜色的干扰。
②脂肪的鉴定实验中,实验材料最好选富含脂肪的种子。
③蛋白质的鉴定实验中,最好选用富含蛋白质的生物组织,植物材料常用的是大豆,动物材料常用的是鸡蛋的蛋清。
(2)做鉴定蛋白质的实验时,在鉴定之前,可以留出一部分样液,以便与鉴定时样液的颜色变化作对比,这样可以增强说服力。
(3)蛋白质要稀释主要是防止蛋白质与双缩脲反应后粘固在试管壁上,使反应不彻底,也不易洗刷试管。
实验的材料的选择和处理有什么要求?
材料的选择 材料的处理
还原性糖的鉴定 含糖高,颜色为白色的植物组织,如苹果和梨 /
脂肪的鉴定 富含脂肪的种子,如花生 浸泡3~4小时
蛋白质的鉴定 富含蛋白