2024届高三生物一轮复习导学案微生物的基本培养技术

2021级生物一轮复习学案 选必3 学案 01 出版：周伟 第2节 微生物的培养技术及应用 1.2.1微生物的基本培养技术 【学习目标】 1概述培养基的营养构成，无菌技术涉及的原理、常用设备和方法。 2.通过进行酵母菌的纯培养，说明微生物纯培养的基本操作要求，初步掌握无菌操作、倒平板、平板划线的基本技能。 【重难点】平板划线操作 【基础知识梳理】 一、培养基的配制 1.培养基的概念：人们按照微生物对_______________的不同需求，配制出的供其生长繁殖____________ 2.功能: ____________、____________、____________ 、____________ 微生物或_____其代谢物。 3.分类：液体培养基不含_______等凝固剂，呈液体状态的培养基。常用于动物细胞培养和发酵工程等。 固体培养基含有凝固剂、呈固体状态的培养基。常用于植物组织培养等。 4.营养和环境条件 （1）各种培养基一般都含有碳源（提供碳元素的物质）、_____（提供氮元素的物质）、水、无机盐等营养物质,此外还需要满足微生物生长对特殊营养物质、_____以及_____ 的需求。 （2）提供主要营养物质的基础上，若培养________，一般需将培养基pH调至酸性；若培养________，一般需将培养基pH调至中性或弱碱性；若培养厌氧微生物，需控制培养环境为________；若培养乳酸杆菌，需在培养基中添加________ （3）培养基中为什么要提供碳源、氮源、水、无机盐？ （4）培养自生固氮菌的培养基中可以不含有____________；培养硝化细菌的培养基中可以不含有_________ （5）牛肉膏蛋白胨培养基中，牛肉膏、蛋白胨提供的主要营养分别是______________________、_______________________；酵母菌纯培养时，用到的马铃薯、琼脂的作用分别是________________________________________、___________________________ 二、无菌技术 1.使用无菌技术的目的：防止________________，获得纯净微生物培养物。 2.无菌技术主要包括_____________、______________ （1）消毒和灭菌的概念 消毒：使用较温和的 ________ 、________或________等方法杀死物体________或______________________微生物 灭菌：用__________________方法杀死物体____________________的微生物，包括__________和__________。 （2）消毒和灭菌后的注意事项：注意避免已经灭菌处理的用具与____________接触。避免______________________的污染，接下来的许多操作都应在______________________并在______________________进行。 （3）消毒和灭菌的比较 比较 具体方法 操作 适用范围 消毒 煮沸消毒法 100℃，5~6min 日常生活 ____消毒法 62~65℃消毒30min或80~90℃30s~1min 不耐高温的液体，如牛奶等 紫外线消毒法 照射前喷洒___________________________溶液，照射30min，加强消毒效果 接种空间，如接种室、接种箱或超净工作台等 化学药物消毒法 用酒精擦拭双手、用______消毒水源等 活体，操作者的衣着和手等 生物消毒法 利用生物或其____________除去环境中部分微生物 灭菌 ________灭菌 利用沸水、流通蒸汽或高压蒸汽（110KPa、121℃、15~30min） 培养基等耐高温，且不需要保持干燥 ________灭菌 160~170℃热空气中维持2~3h 金属用具、培养皿等耐高温且需保持干燥的物品 ________灭菌 在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧 接种工具，接种时的瓶口、试管口等 提 醒 消毒和灭菌都是通过一定手段，使病原体的蛋白质或核酸变性、失活。灭菌的效果比消毒要好。活体生物材料、操作者的双手、空间等只能采用消毒。灭菌适用于耐高温，且需绝对无菌的物品。 （4）酵母菌纯培养时锥形瓶、接种环、烧杯、培养基分别用什么方式灭菌？ 3.无菌技术能防止实验室的培养物被其他外来微生物污染，还能_____________________________