1.2目标微生物的分离和纯化课件2023-2024学年高二下学期生物浙科版选择性必修3

第2课时 第1章 发酵工程 目标微生物的分离和纯化 浙科版 选择性必修3 1 1.能概述分离、纯化微生物的操作方法 2.能概述测定微生物数量的稀释涂布法和显微镜计数法 学习活动 学习总结 学习目标 在固体培养基上采用划线或稀释涂布的方法接种，可获得单菌落 由一个细胞分裂形成的、肉眼可见的、有一定形态构造的子细胞集团，这样的细胞集团称为单菌落。 学习目标 学习总结 学习活动 能概述平板划线法和稀释涂布法分离、纯化微生物的操作方法 任务1：观看平板划线法操作视频，说出图中的各操作步骤的要点 目标 一 学习目标 学习总结 学习活动 1.接种操作时每次划线接种前与接种后都要灼烧接种环或接种针，其目的分别是什么？ 【思考与讨论】 【提示】取菌种前：杀死接种环上原有的微生物。 每次划线前：杀死上次划线时残留的菌种，使下一次划线的菌种直接来源上次划线的末端，从而使每次划线时菌种数目逐渐减少，直至得到单个细胞。 接种结束后：杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。 学习目标 学习总结 学习活动 2.在做第二次划线以及其后的操作时,为什么总是从上一次划线的末端开始划线?为何最后一次划线不能与第一次划线相连？ 【提示】划线后末端含有的细菌数目较少,每次从上一次的末端开始划线能够使细菌的数目随划线次数的增加而逐渐减少,最终分散成单个细胞。最后一次划线已经将细菌稀释成单个细胞,如果与第一次划线相连则增加了细菌的数目,达不到纯化的效果。 学习目标 学习总结 学习活动 【归纳总结】 (1)第一次划线及每次划线之前都需灼烧接种环灭菌,划线操作结束后仍需灼烧接种环,每次灼烧的目的如下表所示。 项目 第一次灼烧 每次划线之前灼烧 划线结束后灼烧 目的 避免接种环上可能存在的微生物污染培养物 杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种,使每次划线的菌种来自上次划线的末端 杀死接种环上残留的菌种,避免菌种污染环境和感染操作者 (2)灼烧接种环后,要待其冷却才能伸入菌液,以免温度太高杀死菌种。(3)划线时最后一区不要与第一区相连。(4)划线时用力要大小适当,防止用力过大将培养基划破。 平板划线法操作的注意事项 学习目标 学习总结 学习活动 平板划线法 【知识讲解】 A.连续平行划线 ------每划一条线都要将接种环在酒精灯的火焰上灭菌 B.扇形划线 C.多次连续平行划线 ------划线可分3~4次进行，不需再次蘸取菌种，只需在上次划线的末端区域直接开始划线即可。 ----从一点出发，向左右连续划平行线 注意：1.无论是何种划线法，蘸取菌种前和划线后，接种环都要灼烧灭菌。 2.无论是何种划线法，菌种只蘸取一次。 学习目标 学习总结 学习活动 任务2：观看稀释涂布平板法操作视频，简述稀释涂布平板法的操作步骤，列表比较两种微生物分离纯化方法的异同 ①系列稀释操作 a．编号为1×102～1×107试管中分别盛有9 mL________。b．将 ______g土样加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。c．取1 mL上清液加入盛有9 mL无菌水的试管中，依次等比稀释。 无菌水 10 学习目标 学习总结 学习活动 取菌液：取0.1 mL菌液，滴加到_______表面 涂布器灭菌：将涂布器放在火焰上灼烧，待酒精燃尽、涂布器______后，再进行涂布 (3)培养：待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板_____，放入____________中培养1～2 d。 ②涂布平板操作 涂布器消毒：将涂布器浸在盛有_______的烧杯中 涂布平板：用涂布器将______均匀地涂布在培养基表面。 培养基 酒精 冷却 菌液 倒置 恒温培养箱 学习目标 学习总结 学习活动 主要方法 平板划线法 稀释涂布平板法 分离结果（画图） 　 　　 关键操作 接种用具 共同点 【提示】 ①一系列的梯度稀释②涂布平板操作 接种环在固体培养基表面连续划线 接种环 涂布器 都要用到固体培养基；都需进行无菌操作；都会在培养基表面形成单个的菌落；都可用于观察菌落特征 学习目标 学习总结 学习活动 任务1：某同学在三种稀释倍数下吸取0.1 mL的稀释菌液涂布平板，统计菌落数，得到以下的数据，试计算1 mL菌液中活菌数。 能概述测定微生物数量的稀释涂布法和显微镜计数法 目标 二 【提示】105的稀释度下取0.1 mL的菌液涂布的三个平板上的菌落数在30~300之间,计算其平均值为(212+234+287)÷3≈244。进一步可以换算出1 g样品中的活菌数约为244÷0.1×105=2.44×108。 1.一般选择菌落数30~300的平板进行计数2.每毫升菌液中微生物细胞的数量＝ 某一稀释倍数下至少3个培养皿的平均菌落数÷菌液稀释液体积×稀释倍数。