1.2 纯净的目标微生物可通过分离和纯化获得（第2课时）（教学课件）生物浙科版选择性必修3

第一节　体液调节是通过化学信号实现的调节 第一节　体液调节是通过化学信号实现的调节 第一章 发酵工程 第二节　神经系统通过下丘脑控制内分泌系统 第二节　神经系统通过下丘脑控制内分泌系统 第二节 纯净的目标微生物可通过 分离和纯化获得 第2课时 目 录 调整培养基配方和培养方式可有目的地培养某种微生物 能分解尿素的微生物的分离与计数 (1)有些微生物需要以现成的有机物为食，如大多数细菌、真菌和原生动物。 (2)有些能利用光能或无机物氧化释放的能量将CO2转变为有机物。 (3)有些微生物为需氧型，有些微生物则是厌氧型。 (4)有些微生物能固氮，而大多数微生物不能以N2作为氮源。 (5)有些菌株由于突变或经人工诱变后丧失了合成某种特定化合物的能力，必须从外界环境获得该物质才能生长繁殖。 一、调整培养基配方和培养方式可有目的地培养某种微生物 1．不同自然环境中生活着的微生物代谢类型不尽相同 在培养光能自养型的蓝细菌或藻类时，只需水和无机盐提供，不需提供有机物，但必须提供光照。 异养生物 自养生物 单击此处编辑母版文本样式 自养型微生物(蓝细菌和藻类或者硝化细菌) 异养型微生物(大多数细菌、真菌和原生动物) 需氧型微生物(醋酸杆菌)；厌氧型微生物(乳酸菌) 兼性厌氧型微生物(酵母菌) 固氮菌(以氮气作为氮源)； 非固氮菌(大多数微生物不能以氮气作为氮源) 常规微生物与营养(某种氨基酸)依赖型微生物 举例 (1)某些异养型微生物在有有机物存在的情况下可同时将CO2转变为自身的物质，它们只是不以CO2为唯一碳源(主要的) (2)自养型微生物也并非不能利用有机物生长。 2．许多微生物的代谢方式并不唯一 这种营养方式的可变性提高了微生物在环境中的生存能力。 紫色非硫细菌 光照,无氧条件：CO2作为碳源；黑暗,有氧：利用有机物生长 单击此处编辑母版文本样式 3．培养基中营养物质的浓度及比例都会影响微生物的生长 小思考：如果让你配制一种培养基，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？ 【答案】用尿素作为唯一氮源，可以将分解尿素的细菌分离出来。 ①蔗糖浓度 ②C/N ③N/P 在利用微生物发酵生产谷氨酸时，培养基中的C/N 为4∶1时菌体大量繁殖，当比值降为3∶1时，菌体繁殖减缓。 选择培养基 单击此处编辑母版文本样式 4.选择培养基 在培养基中添加（或减去）某种化学成分，使得只有某些特定的微生物能够生长，其它微生物均不能生长，这样的培养基称为选择培养基。 添加青霉素的培养基(筛选抗青霉素的超级细菌) 无氮培养基(筛选固氮菌) 以淀粉为唯一碳源的培养基(筛选淀粉分解菌) 以尿素为唯一氮源的培养基？ (筛选尿素分解菌) 使用选择培养基能从混杂的微生物群体中快速筛选出所需要种类的目标微生物，也可以从已知种类的混杂的细胞群体中筛选出特定的细胞。 二、能分解尿素的微生物的分离与计数 1、实验原理 当培养基中只有尿素作为氮源时，只有能分泌脲酶的微生物才能在该培养基中生长。 尿素（脲）是蛋白质降解的产物 氮是所有生物的必须元素。 尿素（脲） C NH2 NH2 O ，会对环境造成污染。 植物无法直接吸收利用尿素 土壤中某些细菌能分泌脲酶，可以通过降解尿素作为其生长所需要的氮源。 尿液中含有尿素。 二、能分解尿素的微生物的分离与计数 1、实验原理 当培养基中只有尿素作为氮源时，只有能分泌脲酶的微生物才能在该培养基中生长。 尿素 中性 碱性 氨 根据菌落（固体培养基）周围是否出现红色区域，进一步鉴定尿素分解菌。在相同培养条件下，圆形红色区域愈大，表明这种菌利用尿素的能力愈强。 红色 黄色 能生长的只有尿素分解菌么？如何确定？ 酚红指示剂 2、实验目的要求 尿素培养基(以尿素为唯一氮源的培养基) 3、实验材料用具 土壤样品，蛋白胨，酵母提取物，NaCl，琼脂，琼脂糖，葡萄糖，K2HPO4，酚红，蒸馏水，尿素溶液，三角瓶，烧杯，培养皿，有塞试管，试管架，移液器，G6玻璃砂漏斗，装有75%酒精的广口瓶，涂布器，酒精灯，火柴，高压灭菌锅，恒温培养箱等。 从有哺乳动物排泄物的地方取得土样 琼脂为混合物含氮， 琼脂糖为纯净物，不含氮 对尿素进行过滤灭菌 琼脂和琼脂糖 琼脂是一种未被纯化的混合物，主要成分为琼脂糖和琼脂果胶，还含有少量的含氮化合物，及其它有机杂质和不溶性杂质。琼脂作为微生物固体培养基不可缺少的组成成分，其优点是： ①其主要成分不能被微生物利用； ②可使培养基固化； 实验是用琼脂糖代替琼脂作为微生物培养基的固化剂，其目的是：尽可能使培养基中