2024届高三生物一轮复习课件10.4 动物细胞工程

第4讲 动物细胞工程 高中生物一轮复习 第十单元 01 动物细胞工程 常用技术手段 动物细胞培养技术(基础) 动物细胞核移植技术 动物细胞融合技术 单克隆抗体的制备 01 动物细胞培养 动物细胞培养是从动物体中取出相关的组织或器官,将它分散成单个细胞,然后在适宜的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。(教材P43) 动物细胞培养所需的基本条件 其他条件 营养条件 糖类、氨基酸、无机盐、维生素 无菌、无毒的环境 适宜的温度、pH和渗透压 适宜的气体环境 动物细胞培养是对体内细胞生长和繁殖的模拟 01 动物细胞培养——条件 营养 ①无机物:无机盐等 ②有机物:糖类、氨基酸、维生素、_等 无菌、 无毒 环境 ①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理 ②在无菌环境下进行操作 ③定期更换_,以便清除代谢物 温度、pH和渗透压 ①温度:哺乳动物细胞多以_为宜 ②pH:多数动物细胞生存的适宜pH为_ 气体环境 血清 培养液 36.5 0.5 7.2~7.4 95%空气和5% CO2 可以用胃蛋白酶处理吗? 不可以,pH不适宜。 用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理,去掉组织间蛋白,将组织分散成单个细胞 动物组织处理后的初次培养 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞通常会停止分裂增殖。 取动物组织 制成细胞悬液 放入CO2培养箱中培养 转入培养液进行原代培养 体外培养的动物细胞 悬浮生长类: 会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻。 贴壁生长类: (大多数) 除受以上因素影响外,还会发生接触抑制现象。 一般取材于动物胚胎或幼龄动物的组织、器官,原因:细胞分化程度低,增殖能力强,容易培养。 原因: a.从动物体取出的成块组织中,细胞与细胞靠在一起,彼此限制了生长和增殖; b.能使细胞与培养液充分接触,更易进行物质交换。保证细胞所需的营养物质的供应及有害产物的及时排出。 分瓶后的细胞培养 取动物组织 制成细胞悬液 放入CO2培养箱中培养 转入培养液进行原代培养 放入CO2 培养箱中培养 传代培养 悬浮生长类:直接用离心法收集 贴壁生长类:重新用胰蛋白酶等处理,使之分散成单个细胞,然后再用离心法收集。将收集的细胞制成细胞悬液,分瓶培养。 01 动物细胞培养 【知识拓展】植物细胞和动物细胞培养的比较 比较项目 植物组织培养 动物细胞培养 原理 植物细胞的全能性 细胞增殖 培养基性质 固体培养基 液体培养基 培养基特有成分 蔗糖、植物激素 葡萄糖、动物血清 培养结果 植物体 细胞群体 培养目的 快速繁殖、作物脱毒等 获得细胞或、细胞产物 典题演练•破解高考 (2021 浙江1月选考)下图为动物成纤维细胞的培养过程示意图。下列叙述正确的是 ( ) A.步骤①的操作不需要在无菌环境中进行 B.步骤②中用盐酸溶解细胞间物质使细胞分离 C.步骤③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶处理 D.步骤④培养过程中不会发生细胞转化 C 典题演练•破解高考 3.[重庆2021 26,15分]为了研究PDCD4基因对小鼠子宫内膜基质细胞凋亡的影响,进行了相关实验。 (1)取小鼠子宫时,为避免细菌污染,手术器具应进行_处理;子宫取出剪碎后,用_处理一定时间,可获得分散的子宫内膜组织细胞,再分离获得基质细胞用于培养。 (2)培养基中营养物质应有_(填写两种);培养箱中CO2浓度为5%,其主要作用是_。 (3)在含PDCD4基因的表达载体中,启动子的作用是_。为了证明PDCD4基因对基质细胞凋亡的作用,以含PDCD4基因的表达载体和基质细胞的混合培养为实验组,还应设立两个对照组,分别为_。 经检测,实验组中PDCD4表达水平和细胞凋亡率显著高于对照组,说明该基因对基质细胞凋亡具有_(填“抑制”或“促进”)作用。 灭菌 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 无机盐、葡萄糖、氨基酸、微量元素、促生长因子、血清或血浆 维持培养液的pH RNA聚合酶的识别和结合位点,驱动转录出相应mRNA 基质细胞悬浮液和空载体与基质细胞的混合培养液 促进 01 干细胞培养及其应用 1.干细胞的定义 一类具有_和_能力的细胞。在一定条件下,可以分化成其他类型的细胞。 分裂 分化 a:分裂,干细胞自我更新 b和c:分化,形成其他类型的细胞 干细胞(stem cell)的培养成功是动物细胞培养领域重大成就之一。 01 干细胞培养及其应用 _等多种组织和器官。 2.干细胞的分布 早期胚胎 骨髓 脐带血 3.干细胞的种类 干细胞 胚胎干细胞 成体干细胞 成体组织或器官内的干细胞,具有组织特异性,只能分化成特定的细胞或组织,不具有发育成完整个体的潜能。 存在于早期胚胎中,具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞,并进一步形成机体的所有组织和器官甚至的潜能。 01 干细胞培养及其应用 胚胎干细胞 简称ES细