2.2 动物细胞的培养精品课件-2022-2023学年高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3

从社会中来——人造皮肤 小面积烧伤：患者通过切除 + 植皮(自身)后恢复 大面积烧伤？ 在治疗大面积烧伤时，通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但自体健康皮肤非常有限，使用他人皮肤来源又不足，而且会产生免疫排斥反应。怎样才能获得大量的自体健康皮肤？ 从社会中来——人造皮肤 通过细胞培养构建的人造皮肤 2.2 动物细胞工程 授课人：曾珍兰 学校： 新化思沁中学 思——回顾深思 探究新知 概 念 从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适当的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。 目 的 获得细胞或细胞产物；不能获得完整动物个体。 原 理 细胞增殖（有丝分裂） 实 例 克隆皮肤 皮肤烧伤 那么，获得这些细胞或细胞产物的具体过程又是怎样的？ 展——合作探究 展示提升 小组合作: 阅读教材P44页并结合动物细胞培养的定义，相关关键词和箭头表达出一般过程。 评——精讲梳理 整合归纳 取动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 动物细胞培养过程 分化程度低，增殖能力强 制成细胞悬液 用机械的方法，或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理的方法，将组织分散成单个细胞 思考1.常用胰蛋白酶分散细胞，这说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？ 说明细胞间的物质主要是蛋白质。 胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6时，胃蛋白酶就失去活性，多数动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性，所以用胃蛋白酶不行。 纤维蛋白、胶原蛋白等 评——精讲梳理 整合归纳 评——精讲梳理 整合归纳 取动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 动物细胞培养过程 分化程度低，增殖能力强 制成细胞悬液 用机械的方法，或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理的方法，将组织分散成单个细胞 思考2.用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理组织块，使组织分散成单个细胞的目的是什么？ ①使细胞与培养液充分接触，一方面保证细胞所需氧气和营养的供应， 另一方面保证细胞内代谢产物的及时排出。②使得在细胞水平操作的其他得以实现。 评——精讲梳理 整合归纳 取动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 动物细胞培养过程 分化程度低，增殖能力强 制成细胞悬液 用机械的方法，或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理的方法，将组织分散成单个细胞 思考3.实验过程中，胰蛋白酶处理时间过长，会出现什么结果？ 细胞膜的成分中含有蛋白质，而胰蛋白酶能够水解蛋白质，因此，胰蛋白酶会把细胞消化掉。因此，胰蛋白酶处理的时间不能太长。 评——精讲梳理 整合归纳 细胞贴壁：在培养瓶悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上。 培养瓶或培养皿壁要求：表面光滑、无毒、易于贴附。 培养皿 培养瓶 癌细胞； 癌细胞的细胞膜上糖蛋白等物质减少 “细胞增殖到互相接触的时候，糖蛋白识别了这种信息，就会使细胞停止继续繁殖，出现接触抑制的现象”试结合上述解释，举例说明哪种细胞无接触抑制现象，并阐述原因。 思考 评——精讲梳理 整合归纳 评——精讲梳理 整合归纳 瓶壁上的细胞层数是：一层（或单层） 贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖。 接触抑制 分瓶培养 解除方法 癌变细胞没有接触抑制现象，可以在培养瓶中形成多层细胞 评——精讲梳理 整合归纳 取动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 动物细胞培养过程 分化程度低，增殖能力强 制成细胞悬液 用机械的方法，或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理的方法，将组织分散成单个细胞 原代培养（10代细胞） 传代培养 出现细胞贴壁，接触抑制 剥离、分瓶 评——精讲梳理 整合归纳 动物细胞培养过程 原代培养 传代培养 细胞株 细胞系 如何界定原代培养和传代培养？细胞株和细胞系？ 洗涤、稀释、分瓶培养 多数细胞固定在表面生长和分裂 随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖 细胞悬浮液 10代细胞 50代细胞 无限传代 思考 评——精讲梳理 整合归纳 细胞株和细胞系 原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到40~50代，这种传代细胞为细胞株。 细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。 细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。 细胞株 细胞系 区别： 评——精讲梳理 整合归纳 将动物组织处理后的初次培养（10代内）。 当原代培养的细胞贴满瓶壁时，重新用胰蛋白酶处理，使细胞从瓶壁脱落，加培养液制成细胞悬液，分装到2个或2个以上的培养瓶中继续培养（10代后）。 保持细胞正常二倍体核型 部分细胞核型改变 遗传物质改变突破细胞寿限 危机1 危机2 培养危机： 原代培养 传代培养 （遗传物质没改变） （遗传物质有的改变） （3）原代培养 （4）传代培养