1.2微生物的培养技术及其应用课件-2022-2023学年高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3

1 目标： 1.概述培养基的配制方法和微生物纯培养的基本操作要求，进行酵母菌的纯培养。 2.明微生物选择培养的原理。 3.进行土壤中分解尿素的细菌的分离和计数。 4.基因工程和微生物的运用 第1课时 微生物的基本培养技术 1.培养基的概念？培养基的作用？ 2.根据物理状态分类？各类的作用？ 3.培养基的一般成分？在此基础上还需要满足什么需求？ 4.自养微生物、异养微生物的的碳源及能源分别是什么？ 基础知识梳理 一、培养基的类型 固体培养基： 分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种 液体培养基：扩大培养，工业生产 具体处理 原理 目的 选择培养基 加入青霉素 青霉素能抑制细菌生长， 对真菌无作用 不加氮源 固氮微生物能利用空气中的氮气 不加有机碳源 自养型微生物能利用无机碳源 鉴别培养基 加入酚红培养基 尿素被分解产生氨，培养基呈碱性，酚红指示剂变红。 加入刚果红 刚果红与纤维素能形成红色复合物，当纤维素被分解后，复合物就无法形成，培养基中会出现以菌落为中心的透明圈。 分离酵母菌、霉菌等真菌 分离固氮菌 分离自养微生物 鉴别分解尿素的细菌 鉴别纤维素 分解菌 拓展：培养基的类型 自养微生物 异养微生物 培养基的成分 基本成分 碳源 氮源 水 无机盐 无机碳源：CO2、CO32-、HCO3- 有机碳源：葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等 无机氮源：NH4＋、NO3- 有机氮源：牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等 一、培养基的配制 5.获得纯净的微生物培养物的关键是？无菌技术的目的？ 6.什么是消毒、灭菌？常用的消毒和灭菌方法有哪些？操作对象分别是？ 基础知识梳理 类型 适用范围 操作方法 消 毒 灭 菌 杀死部分微生物（不包括芽孢、孢子） 杀死所有微生物（包括芽孢、孢子） 煮沸消毒法 日常生活用品 100 ℃煮沸5～6 min 巴氏消毒法 不耐高温的液体 62～65 ℃煮30 min或80-90 ℃煮30s-1 min 化学药剂 生物活体、水源等 擦拭等,如用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源 紫外线 紫外线照射30 min 灼烧灭菌 接种的金属工具、接种时用的试管口或瓶口等 直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧 干热灭菌 耐高温、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿和金属用具等 物品放入干热灭菌箱,160～170 ℃加热2～3h 湿热灭菌 培养基、培养皿等,生产和实验室常用 高压蒸汽灭菌锅内,100 kPa,温度121 ℃,15～30 min 消毒与灭菌 接种室、接种箱，超净工作台 针对不耐高温的液体 接种室、超净工作台 培养皿.吸管等玻璃器皿耐高温、需保持干燥 接种环等金属工具 实验操作者的双手 培养基 家庭餐具等生活用品消毒 a.煮沸消毒法 b.巴氏消毒法 c.化学药剂 d.紫外线 e.灼烧灭菌 f.干热灭菌 g.高压蒸汽灭菌 b d e c a g f 7.培养物、纯培养物的概念？纯培养步骤？ 8.菌落、单菌落的概念？获得单菌落的常用方法？ 基础知识梳理 9.倒平板的过程？冷凝的平板怎么放置？为什么？ 基础知识梳理 将所倒平板放入37℃的恒温箱中培养12h～24h，观察是否有菌落存在以确定是否被污染或灭菌是否彻底。 怎么确定所倒平板未被杂菌污染？ 平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 针对训练 做“微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是(　　) A．高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖 B．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上 C．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落 D．用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上 选D 10.平板划线法的概念及过程？第一灼烧接种环的目的？每次划线前？划线结束？接种环冷却的目的？ 11. 第二次后的划线从上一次的哪里开始？为什么？ 基础知识梳理 杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者 杀死上次划线时残留菌种，使下一次划线的菌种直接来源上次划线的末端，从而使每次划线时菌种数目逐渐减少，直至得到单个细胞 杀死接种环上原有微生物 灼烧时期 目的 取菌种前 每次划线前 接种结束后 第1区划线 接种环灭菌 第2区划线 接种环灭菌 第3区划线 接种环灭菌 接种环灭菌 1 2 3 4 5 ①接种环只蘸一次菌液,但要在培养基不同位置连续划线多次. ②划线首尾不能相接 ③每次划线前接种环进行灭菌 ④划线后,培养皿倒置培养 平板划线法 为纯化菌种，在鉴别培养基上划线接种纤维素降解细菌，培养结果如图所示。下列叙述正确的是（ ） A．倒平板后需间歇晃动，以保证表面平整 B．图中Ⅰ、Ⅱ区的细菌数量均太多，应从Ⅲ区挑取单菌落 C．该实验结果因单