2.2.1动物细胞工程课件-2022-2023学年高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3

2.2.1 动物细胞工程 一、动物细胞培养 1 导入 P43 动物细胞工程 动物细胞培养（基础） 动物细胞融合技术和单克隆抗体 动物体细胞核移植技术和克隆动物 1.动物细胞培养的条件 2.动物细胞培养的过程 3.干细胞培养及应用 2 导入 P43 怎样才能获得大量的自体健康皮肤？ 3 一、动物细胞培养的条件 P43 动物细胞培养：从动物体中取出相关的 ，将它分散成 细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞 的技术。 动物细胞培养需要什么样的条件？ 组织或器官 单个 生长和增殖 ★地位： 动物细胞工程的基础 ★动物细胞培养的原理是： 细胞增殖（有丝分裂） 4 一、动物细胞培养的条件 P43-44 动物细胞培养所需的基本条件 其他条件 营养条件 糖类、氨基酸、无机盐、维生素 无菌、无毒的环境 适宜的温度、pH和渗透压 适宜的气体环境 营养条件 合成培养基 将细胞所需的上述营养物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基，称为合成培养基。 ☆由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，因此，在使用合成培养基时，通常需加入血清和血浆等一些天然成分。 天然培养基 一般使用液体培养基，也称为培养液 5 一、动物细胞培养的条件 P44 无菌、无毒的环境 无菌：无菌操作—防止培养过程中的微生物污染 无毒：定期更换培养液—清除代谢产物，防止代谢产物积累对细胞造成危害。 温度、pH和渗透压 气体环境 温度：36.5±0.5℃ pH：7.2-7.4 渗透压：维持细胞正常形态 O2：细胞代谢所必须 CO2 ：维持培养液的pH值 用培养皿或松盖培养瓶，在95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养。 6 二、动物细胞培养的过程 P44 机械方法、胰蛋白酶处理、胶原蛋白酶处理 思考1.常用胰蛋白酶分散细胞，这说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？ 说明细胞间的物质主要是蛋白质。 胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6时，胃蛋白酶就失去活性，多数动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性，所以用胃蛋白酶不行。 动物 组织块 分散成 单个细胞 7 机械方法、胰蛋白酶处理、胶原蛋白酶处理 动物 组织块 分散成 单个细胞 思考2.用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理组织块，使组织分散成单个细胞的目的是什么？ ①使细胞与培养液充分接触，一方面保证细胞所需氧气和营养的供应，另一方面，另一方面保证细胞内代谢产物的及时排出。 ②使得在细胞水平的其他操作得以实现。 思考3.实验过程中，胰蛋白酶处理时间过长，会出现什么结果？ 细胞膜的成分中含有蛋白质，而胰蛋白酶能够水解蛋白质，因此，胰蛋白酶会把细胞消化掉。因此，胰蛋白酶处理的时间不能太长。 二、动物细胞培养的过程 P44 8 机械方法 胰蛋白酶处理 胶原蛋白酶处理 思考4.为什么要将动物组织块分散成单个细胞，制成细胞悬液？ 动物 组织块 分散成 单个细胞 加培养液 细胞 悬液 细胞接触抑制 二、动物细胞培养的过程 P44 9 机械方法 胰蛋白酶处理 胶原蛋白酶处理 动物 组织块 分散成 单个细胞 加培养液 细胞 悬液 思考4.为什么要将动物组织块分散成单个细胞，制成细胞悬液？ 成块的组织中细胞与细胞靠在一起，彼此限制了细胞生长和增殖 ★体外培养动物细胞分为两类 ①悬浮生长细胞 细胞能够悬浮在培养液中生长增殖 ②贴壁生长细胞 细胞需要贴附于某些基质(如培养瓶壁)表面才能增殖(主要类型) 二、动物细胞培养的过程 P44 10 机械方法 胰蛋白酶处理 胶原蛋白酶处理 动物 组织块 分散成 单个细胞 加培养液 细胞 悬液 细胞贴壁 悬液中大多数分散的细胞很快就贴附在瓶壁上生长增殖，这种现象称为细胞贴壁。 细胞接触抑制 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，