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特色小卷5 生物技术与工程(特色考点)
选择高效降解污染物的菌种有利于土壤修复,莠去津是一种含氮农药,在水中溶解度低,在土壤中不易降解,含过量莠去津的固体培养基不透明,为修复被其污染的土壤,按下图1程序选育能降解莠去津的细菌(目的菌)。匙叶草是一种泌盐植物。科研工作者将匙叶草液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因(TaNHX2基因)转移到棉花细胞内,获得了转基因耐盐棉花新品种。图2是获取的含有目的基因的DNA片段,Sau3AⅠ、EcoRⅠ、BamHⅠ为三种限制酶,图中箭头所指为三种限制酶的切点;图3是三种限制酶的识别序列与酶切位点示意图;图4是土壤农杆菌中用于携带目的基因的Ti质粒结构示意图。请回答下列问题。
(1)由图1推断,从A瓶到C瓶液体培养的目的是__________(填字母,多选)。
A.初步选择能降解莠去津的细菌
B.初步选择能降解莠去津的细菌菌落
C.增加能降解莠去津的细菌数量
D.去除土壤中的杂质
(2)本实验中将C瓶菌种接种到固体培养基的方法是__________________,接种之前通常要进行____________。
(3)一段时间后,培养基出现无透明圈和有透明圈两种菌落。请根据培养结果,结合两种菌落中细菌利用的氮源,分析说明哪种菌落中的细菌是筛选出来的目的菌:________________________________________________________________________。
(4)为弄清固体培养基中的非目的菌是来自C瓶菌种还是培养基,应如何设置对照组?________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(5)基因工程中,Na+/H+逆向转运蛋白基因(TaNHX2基因)的获取除了用图2所示的方法外,还可以通过
________________________________________________________________________获取。
(6)选择合适的限制酶能提高重组质粒的构建效率。切割图2所示DNA片段应优先选用酶________________,切割图4所示质粒应优先选用酶________________;所得重组质粒________(填“能”“不能”或“不一定能”)被BamHⅠ切割。
(7)将含有TaNHX2基因的重组质粒导入受体细胞后,还需要利用__________________技术处理才能得到转基因棉花幼苗,这一技术的原理是________________________________________________________________________
__________________。
(8)为了确定抗盐作物是否培育成功,从个体水平鉴定作物的耐盐性的方法是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(9)将TaNHX2基因导入棉花细胞中成功表达的遗传信息传递途径是______________________________________________________________________。
基因工程自20世纪70年代兴起后,在农牧业、医药卫生和食品工业等方面,展示出广阔的前景。图1是通过基因工程获得转基因生物或产品的流程图,请结合相关知识回答下列问题。
(1)转基因生物反应器是指利用基因工程技术手段将外源基因转化到受体中进行高效表达,从而获得具有重要应用价值的表达产物的生命系统,包括转基因动物、转基因植物和转基因微生物。
①若利用图1流程构建小鼠乳腺生物反应器批量生产人抗利尿激素,应先从人体________细胞中获取总RNA,通过逆转录获得cDNA,再进行PCR后获得抗利尿激素基因。一条单链cDNA在PCR仪中进行n次循环,需要消耗__________个引物。构建的表达载体导入的受体细胞是__________。膀胱反应器有着和乳腺反应器一样的优点:收集产物蛋白比较容易,不会对动物造成伤害。此外,膀胱生物反应器还具有的显著优势在于不受转基因动物________________