内容正文:
第18讲 基因工程
目 录
一、考点过关练(2大考点)
考点01 基因工程的基本工具和基本操作程序 考点02 基因工程的应用及蛋白质工程
二、重难创新练
01 基因工程的基本工具和基本操作程序
1.下图是几种限制酶的切割位点,下列说法正确的是( )
A.限制酶SmaI和EcoRV切割形成的末端,可通过E.coliDNA连接酶相互连接
B.DNA连接酶、DNA聚合酶和RNA聚合酶均可催化磷酸二酯键的形成
C.所有限制酶的识别序列均由6个核苷酸组成
D.SmaI切割后产生的是黏性末端
2.棉蚜是棉花的主要害虫之一。雪花莲凝集素(GNA)与尾穗苋凝集素(ACA)具有良好抗蚜虫效果。研究人员将GNA基因与ACA基因连接成融合基因GA,并构建双抗虫基因的重组表达载体转入棉花,过程如下图。下列叙述错误的是( )
A.构建基因表达载体,应选用BsaBI、KpnI和XhoI酶切
B.BsaBI、KpnI双酶切可确保融合基因与载体的正确连接
C.用农杆菌转化法将目的基因转入棉花愈伤组织需无菌操作
D.可通过采摘抗虫棉的叶片饲喂蚜虫进行个体生物学水平的鉴定
3.T2噬菌体展示技术是将编码外源蛋白的DNA序列插入到T2噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置,使外源基因随外壳蛋白的表达而表达。同时,外源蛋白随T2噬菌体的重新组装而展示到噬菌体表面的生物技术。下列相关叙述正确的是( )
A.要用显微注射法将重组DNA分子导入T2噬菌体
B.成功改造的T2噬菌体的子代病毒也能展示外源蛋白
C.该技术可展示对噬菌体或宿主细胞有毒的蛋白质
D.若用35S标记噬菌体外壳,则可在子代噬菌体表面融合蛋白上检测到35S
4.下列有关PCR技术的实验过程叙述,正确的是( )
A.PCR利用了DNA的热变性原理,实际操作中为了提高循环效率,变性后要迅速冷却,以使引物和模板链尽快结合
B.PCR操作中引物的添加量取决于模板DNA的加入量,如果只加入一个模板DNA进行PCR扩增,需要加入两个不同的引物。
C.延伸过程是溶液中的四种核糖核苷酸在DNA聚合酶作用下,根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。
D.在循环过程中,引物Ⅰ延伸而成的DNA单链会与引物Ⅱ结合,进行DNA的延伸
5.“DNA粗提取与鉴定”实验需要对材料进行选择、处理。为了提取出DNA相对含量较高的白色丝状物,下列对实验材料的选择和处理,正确的是( )
A.以猪成熟红细胞为实验材料时,可在滤液中加入适量的木瓜蛋白酶
B.以菜花为实验材料时,在研磨过程中可加入适量的纤维素酶
C.以植物叶片为实验材料时,一般使用体积分数为50%的预冷酒精提取DNA
D.以香蕉为实验材料时,将研磨液在4℃的冰箱中放置几分钟后,取沉淀物进行离心
6.下列有关限制性内切核酸酶的叙述,正确的是( )
A.目的基因位于DNA分子中部,目的基因两侧具有某限制酶的酶切位点,用该限制酶切割DNA获得目的基因时,被水解的磷酸二酯键有2个
B.限制性内切核酸酶识别序列越短,则该序列在DNA中出现的概率就越大
C.—CATG↓—和—G↓GATCC—序列被限制性内切核酸酶切出的黏性末端可用DNA连接酶连接
D.只有用相同的限制性内切核酸酶处理含目的基因的片段和质粒,才能形成重组质粒
7.下列有关基因工程载体的说法,正确的是( )
A.质粒上碱基之间的数量存在A+G=U+C
B.载体与目的基因结合的过程发生在细胞内
C.天然质粒能够进行自我复制就可以作基因工程载体
D.λ噬菌体的衍生物和动植物病毒也可作为基因工程的载体
8.(不定项)光敏色素基因在调节作物生长发育中具有重要作用。为探讨玉米中光敏色素基因A(含大约256个碱基对)在棉花种质资源创制中的利用价值,研究人员将A基因转入到棉花中,利用对棉花受体细胞进行检测,并通过电泳技术分析结果。该过程所用质粒与含光敏色素基因的DNA上相关限制酶的酶切位点分别如图甲、乙所示,电泳检测结果如图丙。下列相关叙述错误的是( )
A.操作过程中需要用到的工具有限制性内切核酸酶、DNA连接酶和载体
B.构建表达载体时应选用BamHI和HindⅢ这两种限制酶
C.PCR反应过程中每次循环都要经历目的各不相同的两次升温和一次降温
D.由图丙电泳结果可知,1、2、3、4号转基因棉花均培育成功
9.对微生物或动植物的细胞进行基因改造使他们能够生产药物,是目前基因工程在医药卫生领域的应用。如图表示pBR322质粒和人生长激素基因所在片段的结构信息,将二者构建的重组质粒导入大肠杆菌并进行筛选,最终生产出重组人生长激素。回答下列问题:
(1)构建重组质粒时应选择的限制酶组合为 ,原因是 ,被切割后的质粒电泳后,可得到 个条