2.2.1动物细胞培养课件2023-2024学年高二下学期生物人教版选择性必修3

第2节 动物细胞工程 动物细胞培养 动物细胞核移植 动物细胞融合 生产单克隆抗体 动物细胞工程 是最基础的技术 皮肤的自体移植 灰绿色 小面积烧伤：患者通过切除 + 植皮(自身)后恢复 1）使用他人皮肤如何？ 患者自身皮肤的不够用，如何解决？ 大面积烧伤？ 2）培养自身细胞？ 目前，科学家还在研究对皮肤干细胞进行培养，以获得适合临床上使用的人造皮肤。 从社会中来 1、概念： 从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适当的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。 2、目的： 获得细胞或细胞产物；不能获得完整动物个体。 3、原理： 细胞增殖（有丝分裂） 4、实例： 克隆皮肤 皮肤烧伤 那么，获得这些细胞或细胞产物的培养条件和具体过程又是怎样的？ 动物细胞培养 5 一、动物细胞培养的条件 欲使动物细胞体外培养顺利进行，应营造怎样的环境？ 阅读p43-44 思考讨论 6 糖类、氨基酸、 无机盐、维生素 … … 无菌、无毒的环境 适宜的温度、pH和渗透压 适宜的气体环境 + 合成培养基 血清 人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，在使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分。 培养动物细胞一般使用液体培养基，也称培养液。 一 一、动物细胞培养的条件 将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制的培养基。 如何维持无菌、无毒的环境？ 适宜的温度、pH和渗透压分别是多少？ 适宜的气体环境包括？分别有什么作用？如何保持该气体环境？ 对培养液和所有培养用具进行灭菌处理、无菌环境下操作 定期更换培养液，清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。 温度：（36.5±0.5）℃； pH：7.2-7.4 ；适宜的渗透压 95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱； O2是细胞代谢所必需的，CO2的作用是维持培养液的pH； 培养皿或松盖培养瓶。 一 一、动物细胞培养的条件 思考讨论 细胞贴壁 接触抑制 二、动物细胞培养的过程 任务：阅读教材P44-45并结合动物细胞培养的定义，相关关键词和箭头表达出一般过程。 9 一 动物细胞培养过程 用机械法 或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理 原代培养 加培养液 制成细胞悬液在培养皿 或培养瓶内 悬浮生长 贴壁生长 (大多数） ④接触抑制 细胞分裂受阻 解决 传代培养 分瓶 培养 取动物组织 分散成单个细胞 ②制成细胞悬液，分瓶培养。 ①收集细胞 悬浮培养的细胞:直接用离心法收集 贴壁细胞:用胰蛋白酶处理分散成单个细胞，用离心法收集 ①营养物质缺乏、 ②有害代谢废物积累、 ③细胞密度过大等 10 动物细胞培养的过程——重要名词解释 1.为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞呢？可用什么方法？ 2.体外培养动物细胞有哪些类型？ 3.什么是贴壁生长？什么是接触抑制？ 4.什么是原代培养和传代培养？ ①细胞与细胞靠在一起，彼此限制了生长和增殖；②分散有利于与培养液充分接触，保证O2与营养供应和代谢物及时排出。 用机械法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理 ①悬浮生长 ②贴壁生长 ①贴壁生长：需要贴附于某些基质表面才能生长增殖（细胞贴壁），大多数细胞属于此类。 ②接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖。 ①原代培养：通常将分瓶之前的细胞培养，即动物组织经处理后的初次培养； ②传代培养：分瓶后的细胞培养 ④接触抑制 ①营养物质缺乏、 ②有害代谢废物积累、 ③细胞密度过大等 5.为什么要进行分瓶培养？怎么处理？ ①悬浮培养的细胞：直接用离心法收集 ②贴壁细胞：重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞，然后再用离心法收集 动物细胞培养的过程——重要名词解释 悬浮生长 贴壁生长 细胞悬液 细胞贴壁、接触抑制 单层细胞 多层细胞 进行动物细胞培养时常用胰蛋白酶分散细胞，这说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？ 说明细胞间的物质主要是蛋白质。 胃蛋白酶作用的适宜pH约为1.5,当pH大于6时，胃蛋白酶就会失去活性。多数动物细胞培养的适宜pH为7.2～7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性，所以用胃蛋白酶不行。 思考讨论p44 1.幼龄动物的细胞和老龄动物的细胞比较，分化程度低的和分化程度高的细胞比较，哪些细胞更容易培养？为什么？ 2.动物细胞培养与植物组织培养有什么相同和不同之处？ 思考讨论p45 幼龄动物的细胞和分化程度低的细胞，因为这些细胞分裂能力强 15 动物组织 细胞悬浮液 胰蛋白酶 原代培养 传代培养 单个细胞 加培养液 动物细胞培养和植物组织培养的过程 离体的植物器官、组织或细胞 愈伤组织 芽、根 植物体 脱分化 再分化 动物细胞培养 植物组织培养 制成细胞悬液、分瓶培养 16 比较项目 植物组织培养 动物细胞培养