内容正文:
脂肪、糖类、蛋白质鉴定
1 鉴定原理
3 注意事项
2 实验选材
高中生物学
1
(1)脂肪的检测:脂肪+
(2)糖类的检测
①还原糖+ 。
②淀粉+碘液 。
(3)蛋白质的检测:蛋白质+
双缩脲试剂
变性的蛋白质也可,或具有两个及两个以上肽键的化合物
原理:某些化学试剂能够使生物组织中的相关化合物产生特定的颜色反应。
橘黄色
红色
斐林试剂
砖红色沉淀
蓝色
检测原理
50℃~65℃
水浴加热2min
紫色
苏丹IV
苏丹III
1.实验选材基本要求:
①被检测物质含量丰富
②易获取的原则
③颜色浅或接近于浅色
实验选材
苏丹Ⅲ、体积分数为50%的酒精溶液、 蒸馏水
2.试剂:
斐林试剂 甲液:0.1g/mL的NaOH溶液
乙液:0.05g/mL的CuSO4溶液
双缩脲试剂 A液:0.1g/mL的NaOH溶液
B液:0.01g/mL的CuSO4溶液
高中生物学
Cu2+蓝... text has been truncated due to evaluation version limitation.
对提供的材料进行选择和分类:
①苹果 ②花生种子③豆浆 ④梨 ⑤稀释鸡蛋清 ⑥鲜肝提取液 ⑦马铃薯匀浆 ⑧芝麻种子 ⑨西瓜汁 ⑩去皮葡萄匀浆 ⑪白萝卜匀浆
(1)适合还原糖检测的有 。
(2)适合脂肪检测的有 。
(3)适合蛋白质检测的有 。
(4)适合淀粉检测的有 。
⑦
①④⑩⑪
②
③⑤⑥
实验选材
(1)淀粉的检测和观察
高中生物学
高中生物学
实验步骤
(2)脂肪的检测
方法一:花生种子匀浆+3滴苏丹Ⅲ染液→橘黄色
方法二
取材:花生种子(浸泡,去掉种皮)
↓
切片:将子叶切成若干薄片,放入盛有清水的培养皿中待用
↓
制片
↓
观察:先低倍显微镜下寻找已着色颗粒,再高倍显微镜观察 ↓
结论:
①取最薄的切片,用毛笔蘸取放在载玻片中央
②染色:滴2~3滴苏丹Ⅲ染液,染色3 min
③去浮色:加1~2滴 体积分数为50%的酒精 溶液
④制成临时装片:滴一滴蒸馏水,盖上盖玻片
75%——消毒
50%——洗去浮色
圆形小颗粒呈橘黄色,证明花生种子中含有脂肪
选材:
试剂:
制备样液:
颜色反应:
含糖(可溶性糖)量高、白色或近于白色的植物组织
斐林试剂 甲液:0.1g/ml的NaOH
乙液:0.05g/ml的CuSO4
制浆→过滤(一层纱布)→取液
注入2mL梨组织样液
振荡、混合摇匀
注入1mL刚配制好的斐林试剂
变成砖红色
50-65℃的温水
蓝色
棕色
砖红色
新制Cu(OH)2
Cu2O(沉淀)
结论:
组织样液含有还原糖
不宜用甘蔗;不宜用西瓜汁和番茄汁等颜色较重的材料(颜色会掩盖实验结果)
(3).还原糖的检测
不能用酒精灯直接加热
高中生物学
①常见的单糖(葡萄糖、果糖、半乳糖、核糖、脱氧核糖等)、二糖中的麦芽糖、乳糖是还原糖;蔗糖、多糖(淀粉、糖原和纤维素)都不是还原糖。
②非还原糖(如蔗糖)+斐林试剂水浴加热后的现象不是无色而是浅蓝色[Cu(OH)2的颜色]。
提醒
高中生物学
取材
制备组织样液
黄豆组织样液(或鸡蛋蛋清稀释液)
蛋清必须稀释,以免实验后黏住试管壁,不易清洗
鸡蛋清
蛋清稀释液
加水稀释
黄 豆
(侵泡1-2d)
豆浆
研磨
滤液
过滤
(4)蛋白质检测
高中生物学
实验步骤
(4)蛋白质检测
显色反应
现象
摇匀
2mL组
织样液
1mL双缩脲试剂A液
创设碱性环境
3-4滴双缩脲试剂B液
提供Cu2+
无色
蓝色
紫色
蛋白质中肽键在碱性环境遇到Cu2+会形成紫色络合物
A液:质量浓度0. 1g/mlNaOH,B液:质量浓度0. 01g/mlCuSO4先加A液、再加B液
过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应,使溶液呈蓝色,而掩盖生成的紫色。
使用双缩脲试剂时为什么B液只能加3~4滴而不能过量?
斐林试剂 双缩脲试剂
不
同
点 浓度
使用方法
原理
颜色变化
甲液:0.1g/mLNaOH
乙液:0.05g/mLCuSO4
A液:0.1g/mLNaOH
B液:0.01g/mLCuSO4
甲液和乙液混合均匀后方可使用,且现配现用需水浴加热。
使