第3章 第2节 基因工程的基本操作程序-【全频累积】2023高中生物选择性必修3知识点考点全频积累（人教版2019）

444 高中知识点考点全频累积　生物学 D. 粗提取的DNA中可能含有蛋白质 2.（2022·山东省菏泽市高三期末）下列有 关“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，正 确的是（ ） A. 向菜花组织中加入蒸馏水并搅拌可释放核 DNA B. 鉴定DNA时，应将丝状物直接加入到二苯 胺试剂中进行沸水浴加热 C. 过滤液沉淀过程在4 ℃冰箱中进行是为了 防止DNA降解 D. 离心研磨液是为了加速DNA的沉淀 3.（2022·江苏省盐城市高三一模）下表为 常用的限制性内切核酸酶（限制酶）及其识 别序列和切割位点，由此推断的以下说法 中，正确的是（ ） 限制酶名称 识别序列和 切割位点 限制酶名称 识别序列和 切割位点 BamHⅠ ↓GGATCC KpnⅠ ↓ GGTACC EcoRⅠ ↓GAATTC Sau3AⅠ ↓ GATC HindⅠ ↓GTYRAC SmaⅠ ↓ CCCGGG （注：Y＝C或T，R＝A或G） A. 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸 序列 B. 限制酶切割后一定形成黏性末端 C. 不同的限制酶切割DNA分子后可以形成相 同的黏性末端 D. 限制酶的切割位点在识别序列内部 4.（2021·云南省玉溪市第二中学高三阶段练 习）下图为利用鸡血细胞进行DNA的粗提取与 鉴定实验的部分操作示意图，请分析回答： 基因可以通过控制 酶的合成或控制蛋白质 的结构两种方式控制生 物的性状 （1）上述图示中，该实验的正确操作顺序 是 （用 序号与箭头表示）。 （2）在提取过程中使用不同浓度的NaCl溶 液的目的是 。 （3）步骤①的目的是析出并获得DNA，其 依据原理是 。 （4）DNA可用 试剂鉴定，沸水浴 后的颜色反应为 。 （5）实验室还可以利用香蕉等植物样品 提 取 D N A ， 利 用 植 物 组 织 提 取 D N A 时 ， 须 先 破 碎 细 胞 ， 破 碎 细 胞 时 需 添 加 食 盐 和 进行研磨，添加该物质的目的 是 ，而加入食盐的目的 是 。 第2节  基因工程的基本操作程序 知识梳理·探究笔记 解决基本知识问题 知识点1  目的基因的筛选与获取 1. 目的基因 概念：用于改变受体细胞性状或获得预期表达产物等的基因。 2. 筛选合适的目的基因 较为有效的方法：从相关的已知结构和功能清晰的基因中进行筛选。 445 选择性必修 3    第 3 章    基因工程 3. 利用PCR获取和扩增目的基因 （1）PCR的含义：PCR是聚合酶链式反应的缩写，它是一项根据DNA 半保留复制的原理，在体外提供参与DNA复制的各种组分与反应条 件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。 （2）条件：DNA模板、分别与两条模板链结合的2种引物、四种脱氧 核苷酸、耐高温的DNA聚合酶。 （3）过程： ① 变性：温度上升到90 ℃以上，目的基因DNA受热变性后解聚为单链。 ② 复性：温度下降到50 ℃左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条 单链DNA结合。 ③ 延伸：温度上升到72 ℃左右时，溶液中四种脱氧核苷酸在耐高温的 DNA聚合酶的作用下加到引物的3′端合成子链。 ④ 重复循环多次。 （4）结果：每次循环后目的基因的量增加一倍，即成指数形式扩增 （约为2n）。 知识点2  基因表达载体的构建 1. 构建基因表达载体的目的 （1）使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代。 （2）使目的基因能够表达和发挥作用。 2. 基因表达载体的组成 新合成的DNA分子 中含有一条母链，一条 新合成的子链 细胞分裂过程中间期进行DNA分子的复制 每种引物的数量若干 DNA分子体内复制过程中解旋酶使DNA双链解开 引物与单链的结合具有特异性 DNA分子复制过程中子链延伸的方向为从5′端到3′端 包括转录和翻译两个过程 启动子、终止子、起 始密码子和终止密码子的 辨析 （1）启动子 一 段 有 特 殊 结 构 的 D N A片段，位于目的基 因的首端，它是RNA聚合 酶识别和结合的部位，有 了它才能驱动基因转录出 mRNA，最终获得所需要 的蛋白质。 （2）终止子 位 于 目 的 基 因 的 尾 端，也是一段有特殊结构 的DNA片段。终止子相当 于一盏红色信号灯，使转 录在需要的地方停下来。 （3）起始密码子 mRNA中决定肽链合 成起始的相邻的三个碱 基，可编码氨基酸。 （4）终止密码子 mRNA中作为翻译肽 链终止信号的三联体密码 子，可终止蛋白质的合 成，不编码氨基酸。 3. 基因表达载体的构建