内容正文:
第2节
第1课时 微生物的基本培养技术
1.根据微生物的代谢类型分析培养基的组成和种类,并学会培养基的配制。
2.学会区分灭菌和消毒,能进行无菌技术操作。
3.讨论微生物的纯培养的方法,学会酵母菌的纯培养技术。
学习目标
在传统发酵食品的制作过程中,我们没有接种菌种,而是利用了天然存在的菌种。菌种差异、杂菌情况不明和发酵过程的控制缺乏标准等,往往会造成发酵食品的品质不一。
为了缩短发酵时间,确保品质稳定,工业上大规模生产时,通常会先通过微生物培养技术获得单一菌种,再将它们接种到物料中进行发酵。
一、微生物的基本培养技术
细菌 (乳酸菌、蓝细菌、大肠杆菌等)
原生生物 (如草履虫、衣藻等)
真菌 (如酵母菌、霉菌等)
酵母菌
青霉菌
大肠杆菌
蓝细菌
草履虫
衣藻
病毒
禽流感病毒
SARS病毒
微生物:难以用肉眼观察的微小生物的统称。
实验室培养微生物条件:
1)提供微生物生长繁殖所需营养和环境条件
——培养基
2)确保其它微生物无法混入
——无菌技术
微生物结构简单、形体微小,眼睛看不到,若想得到纯净的微生物,就必须对其进行培养和分离。
高压蒸汽灭菌
一、微生物的基本培养技术
3)将需要的微生物分离出来
——微生物的纯培养
微生物生长繁殖产生的菌落:
沙门氏菌
毛霉
一、培养基的配制
1.培养基概念:
人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。
3.培养基类型:
2.培养基作用:
用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。
盛有液体培养基
液体培养基
有无凝固剂(琼脂)
长有酵母菌菌落
固体培养基
用于工业生产
分离、计数、鉴定等
琼脂:在培养中仅作为凝固剂,不能为微生物提供能量和营养
划分标准 培养基种类 特点 用途
物理性质 ————————
用途
不加凝固剂
在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长
培养、分离出特定微生物
在培养基中加入某种指示剂或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物
鉴别不同种类微生物
选择培养基
液体培养基
固体培养基
鉴别培养基
加凝固剂
拓展:培养基的类型
4、培养基的营养构成:
(1)基本成分:
碳源、氮源、水、无机盐
①碳源:
无机碳源:
CO2、CO32-、HCO3-
有机碳源:
葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等
②氮源:
无机氮源:
NH4+、NO3-、NH3等
有机氮源:
牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等
N元素是微生物合成蛋白质、核酸等物质所必需的元素
③无机盐
Zn、Cu、Mn等
大量元素:
微量元素:
自养微生物
异养微生物
牛肉膏、蛋白胨:来源于动物,含有糖、维生素和有机氮等营养物质
Ca、K 、Mg等
4、培养基的营养构成:
(2)特殊需求:
满足微生物对 ___________________ __的需求
④培养厌氧微生物时,需要提供_____的条件。
①培养乳酸杆菌时,需要在培养基中添加_______;
②培养霉菌时,需要将培养基调至_____;
③培养细菌时,需要将培养基调至____ _______;
维生素
酸性
中性或弱碱性
无氧
表1-1 1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的营养组成
组分 含量 提供的主要营养
牛肉膏 5g 碳源、磷酸盐和维生素等
蛋白胨 10g 氮源和维生素等
NaCl 5g 无机盐
H2O 定容至1000ml 水
pH、特殊营养物质、氧气
牛肉膏
蛋白胨
思考:
所有微生物是否都可以用培养基进行培养?
提示:否。病毒是没有细胞结构的微生物,必须在活细胞内寄生并以复制的方式增殖,因此不能用培养基进行培养。目前常用于培养动物病毒的是活鸡胚。
特别提醒 :
1.对部分微生物来说,含C、H、O、N的化合物既是碳源,又是氮源;
有机碳源能提供能量,无机碳源不能提供能量。
2.自养微生物的培养基中可不添加有机碳源,
异养微生物的培养基中必须添加有机碳源。
3.固氮菌能利用空气中的N2,培养基中不需要加入氮源;
非固氮菌不能利用空气中的N2,培养基中需加入氮源。
因其可利用空气中的CO2等无机碳源;
获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染!
使用较为温和的物理、化学或生物等方法,杀死物体表面或内部一部分微生物。
(1)概念:
(2)消毒的方法:
①煮沸消毒法:
②巴氏消毒法:
③化学药剂消毒法:
④紫外线消毒法:
无菌技术
二、
1.消毒
100℃煮沸5-6min。
针对一些不耐高温的液体;
62-65℃下煮30min 或 80-90℃下煮30s-1min。
用70%酒精擦拭双手;氯气消毒水源。
用紫外灯照射接种室、接种箱、超净工作台
指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有微生物,包括芽孢和孢子。
(1)概念:
(2)