内容正文:
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专题十 现代生物科技专题
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专题十 现代生物科技专题
第一讲 基因工程
重点难点突破
突破一 几种容易混淆的酶
下表中的五种酶作用有相似之处,作用的对
象都是核酸,总结如下:
种类
项目
作用底物 作用部位 作用结果
限制酶 DNA分子 磷酸二酯键 形成黏性末端或平末端
DNA连接酶 DNA分子片段 磷酸二酯键 形成重组DNA分子
DNA聚合酶 脱氧核苷酸 磷酸二酯键 形成新的DNA分子
DNA水解酶 DNA分子 磷酸二酯键 形成脱氧核苷酸
DNA解旋酶 DNA分子
碱基对之间
的氢键
形成单链DNA分子
典型例题
例1 [长沙市明德中学测验]下列关于基因工
程中有关酶的叙述不正确的是 ( )
A.
限制酶水解相邻核苷酸间的化学键切
断DNA
B.
DNA连接酶可将末端碱基互补的两个
DNA片段连接起来
C.
DNA聚合酶能够从引物末端延伸DNA
或RNA
D.
逆转录酶以一条RNA为模板合成互补
的DNA
解析 DNA聚合酶只能从引物末端延伸
DNA而不能延伸RNA;限制酶可水解相邻核苷
酸间的化学键,切断DNA;DNA连接酶可将末
端碱基互补的两个DNA片段连接起来;逆转录
酶以一条RNA为模板合成互补的DNA。
答案 C
即时训练
1.
如图为DNA分子在不同酶的作用下所发生
的变化,图中依次表示限制酶、DNA聚合酶、
DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是
( )
① ②
③
④
A.
①②③④ B.
①②④③
C.
①④②③ D.
①④③②
突破二 目的基因的获取方法
方
法
从基因文库中获取 人工合成
从基因组
文库中获取
从部分基因文
库,如 cDNA
文库中获取
化学合成法 反转录法
PCR
过
程
供体细胞中
的DNA
↓限制酶
许 多 DNA
片段
↓插入
载体
↓导入
受体菌群
(基 因 组 文
库)
↓导入
外源DNA扩
增,产生特定
性状
↓分离
目的基因
目 的 基
因mRNA
↓反转录
单链DNA
↓合成
双链DNA
↓插入
载体
↓导入
受体菌群
(cDNA文库)
↓分离
目的基因
蛋白质的氨
基酸序列
↓推测
mRNA 的
核苷
酸序列
↓推测
结构基因的
核苷酸序列
↓化学合成
目的基因
目的基因
的mRNA
↓反转录
单链DNA
↓合成
双链DNA
即目的基因
受热变性
→ 降 温、
引物结合
到 互 补
DNA 链
→ 升 温、
Taq 酶从
引物起始
进行互补
链的合成
→ 循 环
往复
高考总复习·生物
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续表
优
点
操作简单 专一性强
专一性强,可
产 生 自 然 界
中 不 存 在 的
新基因
专一性强
用 时 短,
获 DNA
量多
缺
点
工作量大,盲
目性大,专一
性差
操 作 过 程 较
麻烦,技术要
求过高
适用范围小
操 作 过 程 麻
烦,mRNA存
在时间短,技
术要求高
技 术 要
求高
典型例题
例2 [泉州市第五中学期中]下图中甲、乙表
示从细菌细胞中获取目的基因的两种方法,以下
说法中错误的是 ( )
A.
甲方法可建立该细菌的基因组文库
B.
乙方法可建立该细菌的cDNA文库
C.
甲方法要以脱氧核苷酸为原料
D.
乙方法需要反转录酶参与
解析 甲方法是从细菌的DNA中直接提
取目的基因,故可以建立该细菌的基因组文库。
乙方法是由 mRNA反转录形成目的基因,故可
以建立该细菌的cDNA文库。乙方法要以脱氧
核苷酸为原料,且需要反转录酶参与。
答案 C
即时训练
2.
利用人胰岛B细胞构建cDNA文库,然后通
过核酸分子杂交技术从中筛选目的基因,筛
选过程如下图所示。下列说法错误的是
( )
A.
cDNA文库的构建需要用到逆转录酶
B.
图中的菌落是通过稀释涂布法获得的
C.
核酸分子杂交的原理是碱基互补配对
D.
从该文库中可筛选到胰高血糖素基因
突破三 目的基因检测与鉴定的方法的比较
类型 步骤