内容正文:
三、检测生物组织中的
糖类、蛋白质、脂肪、淀粉
三,实验探究
检测生物组织中的糖类、脂防和蛋白质
实验原理:生物中化合物+化学试剂→特定的颜色反应。
还原糖+斐林试剂→砖红色沉淀
试剂现配现用,且需水浴加热)
脂肪+苏丹川染液→橘黄色
蛋白质+双缩脲试剂→紫色(碱性条件下)
淀粉+碘液→蓝色
糖类鉴定
(1)实验原理
化学试剂+有机化合物→特定的颜色
还原糖+斐林试剂水浴加璃砖红色沉淀
斐林试剂:甲液:0.1g/mL的NaOH溶液
乙液:0.05g/mL的CuS0O4溶液
使用注意事项:等量混合均勻,现配现用(
NaOH+CuSO4)
1.点拨
还原糖+斐林试剂
水浴
加热
砖红色沉淀
可溶性还原糖与斐林试剂发生作用,可生
成砖红色的Cu2O沉淀
。
(放在盛有50-65°℃温水的大烧杯)
颜色变化:浅蓝色一棕色一砖红色
思考:西瓜、甘蔗、苹果可以作为实验材
料?为什么?
甘蔗主要含有蔗糖,不是还原糖。
西瓜汁有颜色,会遮盖实验的砖红色。
注意事项:
选择还原糖含量较高
颜色为无色或接近白色的材料
二、蛋白质鉴定
(1)原理
(碱性条件下)
蛋白质+双缩脲试剂→紫色
双缩脲试剂组成:
A液:0.1g/mL的NaOH溶液
B液:0.01g/mL的CuSO4溶液
2步骤:
(1)试管中加样液2mL
(2)加双缩脲试剂A液2mL(造成碱性环境),摇勻
(3)加双缩脲试剂B液3-4滴,摇勻
(4)观察颜色变化(紫色)
注:①若用蛋清液作材料,必须稀释,
防止其
黏在试管上不易刷洗。
②B液不能过量,多余的B液会与A液反应成蓝色,而掩
盖生成的紫色。
比较斐林试剂和双缩脲试剂
斐林试剂
双缩脲试剂
甲液
乙液
A液
B液
成分
0.1g/mL
0.05g/
同甲液
0.01g/
NaOH
mLCuS
mLCuS
鉴定物质
还原性糖04
蛋白质04
添加顺序方
先加A液2mL,摇勻,
法
等量混合后再加入
再加B液3-4滴
反应条件
50-65°C水浴加热
不需加热,摇匀
反应现象
砖红色沉淀
紫色络合物
三、脂肪鉴定
(1)实验原理
脂肪+苏丹川→橘黄色
脂肪+苏丹V→红色
(2)步骤
材料的选取:含脂防量高的组织,如花生的子叶。
①取材:取一粒浸泡过的花生种子,去掉种皮
②切片:切片越薄越好
③制片:将最薄的花生切片放在载玻片中央
④染色:滴2~3滴苏丹ll染液,染色3min;
用吸水纸吸去染液,再滴体积分数50%的酒精洗去浮色,再用
吸水纸吸去多余的酒精(苏丹川易溶于酒精中,避免影响实验
结果);
滴1~2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片
⑤镜检观察:光学显微镜对光→低倍镜寻找着色圆形小颗粒→高
倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒