内容正文:
专题02 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
1.实验原理
(1)还原糖(葡萄糖、麦芽糖、果糖等)+斐林试剂砖红色沉淀。
(2)脂肪+苏丹Ⅲ染液→橘黄色。
(3)蛋白质+双缩脲试剂→紫色。
2.实验流程
(1)还原糖的检测和观察
(2)脂肪的检测和观察
制作子叶临时切片,用显微镜观察子叶细胞的着色情况(以花生为例)
(3)蛋白质的检测和观察
1.区分斐林试剂与双缩脲试剂:
“一同”是指都含有NaOH和CuSO4两种成分,且NaOH溶液的质量浓度都为0.1 g/mL。
“三不同”分别指:
a. 使用原理不同:斐林试剂的实质是新配制的Cu(OH)2溶液,双缩脲试剂的实质是碱性环境中的Cu2+。
b. 使用方法不同:鉴定还原糖时将甲、乙两液等量混匀后立即使用;鉴定蛋白质时先加A液1 mL摇匀,然后加B液4滴,振荡摇匀。
c. CuSO4溶液的浓度不同:斐林试剂中CuSO4溶液的质量浓度为0.05 g/mL,双缩脲试剂中CuSO4溶液的质量浓度为0.01 g/mL。
易错点拨:混淆双缩脲试剂和斐林试剂的有效成分:斐林试剂的有效成分是氢氧化铜,双缩脲试剂的有效成分是碱性条件下的Cu2+。
2.实验材料的选择
(1)所选材料应富含被检测的有机物,易出现明显的实验现象。
(2)材料本身应为白色或近于白色,不干扰实验结果。
3.三类有机物的检测在操作上的差异
(1)唯一需要加热的——还原糖的检测,若不加热,则无砖红色沉淀出现。
(2)唯一需要显微镜的——花生子叶切片脂肪的检测。
(3)混合后加入的——斐林试剂;分别加入的——双缩脲试剂。
(4)实验结果分析:
①如果组织样液与斐林试剂反应呈现砖红色,就说明溶液中有葡萄糖吗?
不能,只能说明有还原糖。
②还原糖的鉴定实验中,溶液的颜色是由无色变为砖红色吗?
不是,蓝色到棕色再到砖红色。
③可以采用显微镜观察细胞内染色的油滴,也可以通过观察组织样液颜色的变化确定含有脂肪。
④平时使用的酶如淀粉酶、蛋白酶等的化学本质也是蛋白质,与双缩脲试剂同样显紫色。将淀粉和淀粉酶混合,用斐林试剂鉴定,呈现砖红色;用双缩脲试剂鉴定,呈现紫色。
4.注意事项
(1)蛋白质检测时,双缩脲试剂的加入顺序:先加A液,再加B液,且B液不能过量。目的是先制造碱性环境。若先加B液或B液过量,会生成Cu(OH)2,干扰颜色反应。
(2)在蛋白质检测实验中,需要将鸡蛋清稀释到一定程度,否则与双缩脲试剂发生反应后,会黏在试管的内壁上,反应不彻底,试管也不易刷洗。
1.(2022·重庆·统考高考真题)在一定条件下,斐林试剂可与葡萄糖反应生成砖红色沉淀,去除沉淀后的溶液蓝色变浅,测定其吸光值可用于计算葡萄糖含量。下表是用该方法检测不同样本的结果。下列叙述正确的是( )
样本
①
②
③
④
⑤
⑥
吸光值
0.616
0.606
0.595
0.583
0.571
0.564
葡萄糖含量(mg/mL)
0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
A.斐林试剂与样本混合后立即生成砖红色沉淀
B.吸光值与样本的葡萄糖含量有关,与斐林试剂的用量无关
C.若某样本的吸光值为0.578,则其葡萄糖含量大于0.4mg/mL
D.在一定范围内葡萄糖含量越高,反应液去除沉淀后蓝色越浅
2.(2022·江苏·统考高考真题)下列物质的鉴定实验中所用试剂与现象对应关系错误的是( )
A.还原糖-斐林试剂-砖红色 B.DNA-台盼蓝染液-蓝色
C.脂肪-苏丹Ⅲ染液-橘黄色 D.淀粉-碘液-蓝色
3.(2020·浙江·统考高考真题)为检测生物组织中的还原糖,制备了某苹果的两种提取液:①浅红色混浊的匀浆;②浅黄色澄清的匀浆。下列叙述正确的是
A.提取液②加入本尼迪特试剂并加热产生红黄色沉淀,说明②中含有还原糖
B.与提取液②相比,①更适合用于检测苹果中的还原糖
C.提取液中含有淀粉、少量的麦芽糖和蔗糖等还原糖
D.检测还原糖时,先加入双缩脲试剂A液再加入B液
4.(2019·海南·统考高考真题)下列检测生物分子的实验中,关于颜色变化的叙述错误的是( )
A.淀粉遇碘液可显蓝色
B.葡萄糖与斐林试剂反应呈砖红色
C.蛋白质与双缩脲试剂反应显紫色
D.脂肪被苏丹IV染液染成橘黄色
5.(2019·江苏·统考高考真题)为探究玉米籽粒发芽过程中一些有机物含量的变化,研究小组利用下列供选材料用具进行了实验。材料用具:玉米籽粒;斐林试剂,双缩脲试剂,碘液,缓冲液,淀粉,淀粉酶等;研钵,水浴锅,天平,试管,滴管,量筒,容量瓶,显微镜,玻片,酒精灯等。请回答下列问题:
(1)为了检测玉米籽粒发芽过程中蛋白质(肽类)含量变化,在不同发芽阶段玉米提取液中,分别加入 试剂,比较颜色变化。该实验需要选用的器