专题35 微生物的培养技术及应用（串讲）-备战2024年高考生物一轮复习串讲精练（新高考专用）

6学科网 学种网原创，让学司更容易！ .CO JP.ZXXK.COM 学科网精品频道全力推荐 专题35微生物的培养技术及应用 考点分布 重点难点 备考指南 理解掌握微生物各种分离原理和方法。 1.微生物的实验室培养 1.微生物的分离和培养 理解并学握微生物数量测定的步骤和注 2.微生物的分离与计数 2某种微生物数量的测定 意事项。 3.培养基对微生物的选择作用 掌握培养基的选择方法。 考点一微生物的基本培养技术 知识梳理 1.培养基是人们按照微生物对 的不同需求，配制出供其 的营养 基质。 一般都含有」 和无机盐。此外，还需要满足微生物生长对、氧气以及 的要求 培养基按物理状态可分为液体培养基和 按功能可分为选择培养基和 2.无菌技术的目的是获得 。关键是防止 的入侵。常用方法有 和 一。灭菌桶装入待灭菌物品不要装太挤的原因是 。 加热灭菌锅时应打开排气阀，目的是 ，之后，才能关上排气阀。 3.纯化培养的方法有平板划线法和 法。菌落是由 繁殖而来的肉 眼可见的子细胞群体。 平板划线法分离纯化大肠杆菌的步骤： ①接种：在装有液体培养基的三角瓶中接种大肠杆菌，在摇床上℃下振荡培养12h。 ②划线分离：用在接种有大肠杆菌的三角瓶中沾取菌液一次，在固体培养基的平板上 连续划线，盖好培养皿。 ③培养观察：将培养皿倒置，放在℃恒温箱中培养12~24h后，可看到划线的末端 出现不连续的单个一。 4.微生物的接种方法除平板划线法和稀释涂布平板法外，还包括接种、 接种等方 法。 微生物接种的核心是 5.(1)平板冷凝后，要将平板倒置，原因是 1 ⊙。原创精品资源学科网独家享有版权，侵权必究！ 而学科网 学种网原创，让学司更容易！ JP.ZXXK.COM 学科网精品频道全力推荐 (2)在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板不能用 米 培 养 微 生 物 原 因 是 (3)平板划线法在做第二次以及其后的划线操作时，总是从上一次划线的末端开始划线，原 因是 考点精讲 1.(1)制备牛肉膏蛋白陈固体培养基 计算一称量→溶化→调p→灭菌→倒平板 (2)纯化大肠杆菌的方法 ①平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释 分散到培养基的表面。 ②稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼 脂固体培养基的表面，进行培养。 2.稀释涂布平板法步骤 ①系列稀释操作：该操作常用在将细胞接种到培养基之前，通过液体稀释的方法分散细胞， 随若稀释程度的增大，单位体积中的微生物细胞数量减少，细胞得以分散。 操作步骤： I mL 1 mL I mL 1 mL I mL I ml 10 9 mL 9 mL 9 ml 稀释液稀释液稀释液稀释液稀释液稀液 ②涂布平板操作步骤 涂布器 品多 取少量菌 液（不超 用涂布器将菌 涂布器浸在 过0.1mL). 液均匀地涂布 盛有酒精的滴加到培 将沾有少量酒精 在培养基表面 烧杯中 养基表面 的涂布器在火馅 途布时可转动 上引燃，待酒精 燃尽后，冷却 培养皿，使菌液 分布均匀 8-108 3.选择培养基与鉴别培养基的比较 ⊙⊙原创精品资源学科网独家享有版权，侵权必究！ 学科网 学种网原创，让学司更容易！ .CO JP.ZXXK.COM 学科网精品频道全力推荐 项目 选择培养基 鉴别培养基 制各方法 培养基中加入某些化学物质 培养基中加入某种指示剂或化学药品 依据某些微生物对某些物质或环境条 原理 产生特定的颜色或其他变化 件的嗜好或抗性而设计 用途 从众多微生物中分离出所需的微生物 鉴别不同种类的微生物 4.消毒和灭菌的辨析 项目 条件 结果 常用方法 应用范围 煮沸消毒法 日常用品 仅杀死物体表面或 较为温和 巴氏消毒法 不耐高温的液体 内部的部分微生物 消毒 的物理或 用酒精擦拭双 (不包括芽孢和孢 化学方法 化学药剂消毒法 手、用氣气消毒 子) 水源 灼烧灭菌法 接种工具 杀死物体内外所有 玻璃器皿、金属 强烈的理 干热灭菌法 灭菌 的微生物，包括芽孢 用具 化因素 和孢子 培养基及容器的 高压蒸汽灭菌法 灭菌 5.两种纯化方法的比较 项目 平板划线法 稀释涂布平板法 分离结果 关键操作 接种环在固体培养基表面连续划线 ①一系列的梯度稀释②涂布平板操作 接种用具 接种环 涂布器 (1)接种环的灼烧：①第一次划线前， (1)在进行稀释操作时，每支试管及其 避免接种环上可能存在的微生物污染 中的9mL水、移液管均需灭菌：操作 培养基：②再次划线前，杀死上次划线 时，试管口和移液管应在离酒精灯火 注意事项 结束后接种环上残留的菌种，使每次划 焰1~2cm处。 线的菌种直接来源于上次划线的末端： (2)涂布平板时：①涂布器用体积分数 ③划线结