内容正文:
第 1 讲 第 2 课时 微生物的培养技术及应用 (概念理清课)
[建知识体系]
[记核心语句]
1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还能有效避免操作者自身被微生物感染。
2.消毒仅杀死物体表面或内部一部分对人体等有害的微生物,灭菌是杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。
3.平板划线法是通过接种环连续划线,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面,不可以用来对微生物计数。
4.稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。因为当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。
5.平板划线操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物;每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后,接种环上残留的菌种,使下一次划线时,接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端。
6.如果基础培养基中的菌落数明显大于选择培养基中的数目,则说明该选择培养基有选择功能。
7.只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,利用以尿素为唯一氮源的选择培养基,可从土壤中分离出分解尿素的细菌。
系统学习(一) 培养基及微生物的纯培养技术
主干知识·系统成
(一)培养基的配制
1.培养基:人们按照微生物对_________的不同需求,配制出的供其__________的营养基质。
营养物质
生长繁殖
2.种类
3.成分
各种培养基一般都含有水、_____、氮源和_______,此外还要满足微生物生长对____、特殊营养物质以及O2的需求。
(二)无菌技术
1.含义:在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。
碳源
无机盐
pH
2.常用方法
消毒 灭菌
条件 _________的物理、化学或生物等方法 强烈的理化方法
结果 杀死物体表面或内部的部分微生物 杀死物体内外______________ (包括芽孢和孢子)
常用方法 煮沸消毒法、__________、化学药剂消毒法、紫外线消毒法 _________、干热灭菌、________
较为温和
所有的微生物
巴氏消毒法
湿热灭菌
灼烧灭菌
(三)微生物的纯培养
1.概念:由_________繁殖所获得的微生物群体是纯培养物,获得
__________的过程就是纯培养。
2.过程:包括____________、灭菌、接种、_____和培养等。
3.常用方法: _________法和_____________法。
单一个体
纯培养物
配制培养基
分离
平板划线
稀释涂布平板
4.实例——酵母菌的纯培养
澄清概念微练
一、判断叙述正误
(1)在培养细菌时,要将培养基调至中性或弱酸性。 ( )
(2)消毒的原则是既杀死材料表面的微生物,又减少消毒剂对细胞的伤害。 ( )
(3)无菌操作的对象只要是没有生物活性的材料(如培养基、接种环等)都可采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。 ( )
(4)待灭菌后的培养基冷却至50 ℃左右时,在酒精灯火焰附近倒平板。 ( )
×
√
×
√
(5)平板划线法中每一次划线后要将接种环灼烧。 ( )
(6)倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上。 ( )
√
×
二、教材情境思考
(1)(选择性必修3 P10旁栏思考)无菌技术除用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么作用?
提示:还能有效避免操作者自身被微生物感染。
(2)根据教材选择性必修3 P12“探究·实践”相关内容及图示分析以下问题:
①为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?平板冷凝后,为什么要将平板倒置?
提示:通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面湿度也比较高,将平板倒置,既可以防止培养基表面的水分过快地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。
②平板划线法在作第二次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开始划线?目的是什么?
提示:划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,第二次以及其后的划线从上一次划线的末端开始,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落