内容正文:
第十一单元|现代生物科技专题(选修3)
第一讲 基因工程
知识点一 基因工程
落实主干知识
一、基因工程的概念分析
来源 主要是从 生物中分离纯化出来的
作用 识别双链DNA分子的某种特定的 ,并切开特定部位的两个核苷酸之间的___________
结果 产生 或平末端
二、基因工程的操作工具
1.限制性核酸内切酶(简称限制酶)
原核
核苷酸序列
磷酸二酯键
黏性末端
[微提醒] 正确认识限制酶
①限制酶是一类酶,而不是一种酶。
②将一个基因从DNA分子上切割下来,需要切两处,同时产生四个黏性末端或平末端。
③不同DNA分子用同一种限制酶切割,产生的末端都相同,同一个DNA分子用不同的限制酶切割,产生的末端一般不相同。
④限制酶切割位点应位于标记基因之外,不能破坏标记基因,以便进行检测。
⑤限制酶不切割自身DNA的原因是原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。
2.DNA连接酶
种类 E·coli DNA连接酶 T4DNA连接酶
来源 ____________ T4噬菌体
特点 只缝合_____末端 缝合_____末端和平末端
作用 恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的___________,连接两个DNA片段
大肠杆菌
黏性
黏性
磷酸二酯键
3.载体
(1)作用:携带外源DNA片段进入_________。
(2)种类:_____、λ噬菌体的衍生物、___________等。
[微提醒] 基因载体与膜载体的区别
基因工程中的载体是DNA,能将目的基因导入受体细胞内,它能在宿主细胞内稳定存在,并可对目的基因进行大量复制;膜载体是蛋白质,与细胞膜的通透性有关。
受体细胞
质粒
动植物病毒
限制酶切割位点
标记基因
编码蛋白质
基因文库
PCR技术
稳定存在
遗传
表达
(2)基因表达载体的组成
3.目的基因导入受体细胞
项目 植物细胞 动物细胞 微生物细胞
常用方法 ____________法、基因枪法、____________法 ________技术 Ca2+处理法
受体细胞 受精卵、体细胞 ________ 原核细胞
农杆菌转化
花粉管通道
显微注射
受精卵
4.目的基因的检测与鉴定
检测目的 检测方法 判断标准
目的基因是否插入转基因生物的DNA ______________技术 是否出现杂交带
目的基因是否转录出了mRNA 分子杂交技术 是否出现______
目的基因是否翻译出蛋白质 _______________技术 是否出现杂交带
个体水平的检测 如抗虫、抗病的接种实验 是否表现出
相应的特性
DNA分子杂交
抗原—抗体杂交
杂交带
四、基因工程的应用
1.动物基因工程:提高动物__________从而提高产品产量;改善畜产品品质;用转基因动物生产药物;用转基因动物作器官移植的_____等。
2.植物基因工程:培育抗虫转基因植物(如抗虫棉)、抗病转基因植物(如转基因烟草)和抗逆转基因植物(如抗寒番茄);利用转基因改良植物的品质(如新花色矮牵牛)。
3.基因诊断与基因治疗
(1)基因诊断:又称为DNA诊断,是采用_________的方法来判断患者是否出现了基因异常或携带病原体。
生长速度
供体
基因检测
(2)基因治疗
概念 把________导入病人体内,使该基因的表达产物发挥功能,从而达到治疗疾病的目的
成果 将腺苷酸脱氨酶基因转入取自患者的淋巴细胞中,使淋巴细胞能产生腺苷酸脱氨酶,然后,再将这种淋巴细胞转入患者体内,从而治疗复合型免疫缺陷症
类型 体外基因治疗 从病人体内获得某种细胞,在体外完成_________,再输回患者体内
体内基因治疗 直接向人体_________中转移基因
正常基因
基因转移
组织细胞
1.实现基因精确的操作过程至少需要三种工具,即准确切割DNA的“手术刀”、将DNA片段再连接起来的“缝合针”、将体外重组的DNA导入受体细胞的“运输工具”。
(1)限制酶只能用于切割DNA获得目的基因。 ( )
(2)切割质粒的限制性核酸内切酶均能特异性地识别6个核苷酸序列。 ( )
(3)DNA连接酶能将两碱基间通过氢键连起来。 ( )
(4)E·coli DNA连接酶既可以连接平末端,又可以连接黏性末端。 ( )
(5)质粒是小型环状DNA分子,是基因工程常用的载体。 ( )
(6)用于载体的质粒DNA分子上至少含一个限制酶识别位点。 ( )
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2.基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤,即目的基因获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。
(1)外源DNA必须位于重组质粒的启