内容正文:
基因工程(二)
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(Ⅱ)基因工程的应用
(Ⅰ)蛋白质工程
DNA的粗提取和鉴定
2019生物考纲
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一、基因工程的应用
转基因植物
Ⅰ
转基因动物
Ⅱ
基因治疗
Ⅲ
Ⅳ
基因工程药物
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转基因植物
Ⅰ
-提高农作物的抗逆能力,改良植物的品质。
抗虫转基因植物:
抗病转基因植物:
病毒外壳蛋白基因、病毒复制酶基因
几丁质酶基因、抗毒素合成基因
Bt毒蛋白基因、蛋白酶、淀粉酶抑制剂基因、植物凝集素基因
调节细胞渗透压的基因
抗冻蛋白基因
抗除草剂基因
抗逆转基因植物:
品质改良转基因植物:
控制番茄果实成熟的基因
控制植物花青素代谢的基因
必需氨基酸含量多的蛋白质基因
控制必需氨基酸合成途径中关键酶基因
抗虫绵
苏云金杆菌
抗盐碱、抗干旱
耐寒
抗除草剂
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转基因动物
Ⅱ
提高动物生长速度:
改善畜产品品质:
用转基因动物生产药物:
用转基因动物作器官移植的供体:
外源生长激素基因
肠乳糖酶基因
可以抑制抗原决定基因表达的调节因子或设法除去抗原决定基因
乳腺生物反应器或乳房生物反应器:将药用蛋白基因与 乳腺蛋白基因的启动子重组在一起,显微注射进入哺乳动物的受精卵,将 其 送入母体,使其发育成转基因动物。转基因动物进入泌乳期后,可以通过分泌乳汁生产所需要的药品。
优点①产量高;②质量好;③成本低;④易提取。
膀胱生物反应器:
不受性别年龄的限制,而且药物提取更加简便
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基因工程药物
Ⅲ
利用转基因工程菌生产________类药物
蛋白
举例:抗体、疫苗、激素、细胞因子、干扰素
基因治疗
Ⅳ
:把正常基因导入病人体内,使得基因表达产物发挥作用,从而达到治疗疾病的目的,治疗遗传病最有效的手段。
___(是否)破坏、替代异常基因本身,获得的性状___(是否)遗传给下一代
否
否
举例:复合型免疫缺陷症(将腺苷酸脱氨酶基因转入取自患者的淋巴细胞中,再将这种淋巴细胞转入患者体内)。
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基因治疗
Ⅳ
基因表达
正常基因
碱基互补配对
DNA探针
根据基因转移的过程在体内还是体外发生分为:体内基因治疗和体外基因治疗。
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二、蛋白质工程
是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产和生活的需求。
1.生产的是自然界没有的新的蛋白质
(基因工程生产自然界已存在的蛋白质)
2.通过基因操作实现
新基因 新蛋白质
第二代基因工程
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蛋白质工程流程图
二、蛋白质工程
体现原理:(1)结构决定功能
(2)中心法则
基本途径:从预期蛋白质功能出发→设计预期蛋白质结构→
推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列
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三、DNA的粗提取和鉴定
粗提
原理
基本思路:用一定的物理或化学方法分离
DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线
氯化钠浓度为0.14mol/L时,DNA溶解度最小,如果小于0.14mol/L,DNA 的溶解度随氯化钠溶液浓度增加而逐渐降低,如果大于0.14mol/L,DNA 的溶解度随氯化钠溶液浓度增加而逐渐增加
1.DNA或蛋白质等成分在不同浓度的NaCl
溶液中溶解度不同。
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三、DNA的粗提取和鉴定
2.DNA不溶于酒精溶液,但细胞内的某些蛋白质溶于酒精,利用这个原理,可将DNA与蛋白质进一步的分离。
95%冷酒精
含DNA的丝状物
基本思路:用一定的物理或化学方法分离
提纯
原理
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三、DNA的粗提取和鉴定
a.蛋白酶能水解蛋白质,但对DNA不起作用
b.大多蛋白质在60~80℃高温下变性,而DNA在高于80℃才变性
c.洗涤剂能瓦解细胞膜,但对DNA无影响
基本思路:用一定的物理或化学方法分离
其他
原理
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三、DNA的粗提取和鉴定
在沸水浴的条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色
鉴定
原理
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三、DNA的粗提取和鉴定
选材 → 破碎细胞,获取DNA滤液 → 去除杂质→析出DNA → 鉴定
实验
流程
1.实验材料的选择
菜花、香蕉、紫色洋葱、菠菜叶、豌豆、鸡血细胞、哺乳动物血细胞、猪肝
理想材料:DNA含量高、易破碎,最好没有颜色干扰的组织
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三、DNA的粗提取和鉴定
实验
流程
2.破碎细胞,获取DNA的滤液
(1)破碎动物细胞-渗透吸水的原理
DNA、蛋白质、
其他物质
过滤
(2)破碎植物细胞-加入洗涤剂和一定浓度的氯化钠进行研磨
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三、DNA的粗提取和鉴定
实验
流程
3.去除滤液中的杂质
a.加不同浓度的NaCl溶液,析出DNA
b.加蛋白酶分解蛋白质反应10~15min
c.将滤液放置在60~75℃的水浴中保温10~15min
过滤杂