2.2.1动物细胞工程课件2022-2023学年高二下学期生物人教版选择性必修3

动物细胞培养 动物细胞融合 动物细胞核移植 第2节 动物细胞工程 第2章 细胞工程 是动物细胞工程的基础 一 动物细胞培养 动物细胞培养 从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。 1.原理： 2.地位： 动物细胞工程的基础 细胞增殖 【思考】：动物组织的选择： 幼龄动物 or 老龄动物 幼龄动物的细胞分化程度低、分裂能力强，易培养。 动物细胞培养 从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。 1.原理： 2.地位： 3.培养对象： 4.目的： 胚胎或幼龄动物的细胞 获得细胞或者细胞产物 细胞分化程度低、分裂能力强，易培养。 动物细胞工程的基础 细胞增殖 一、动物细胞培养的条件 1.营养 (1)成分 ②动物血清 由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚， 血清可以补充合成培养基中缺乏的物质。 ①葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等 1.营养 (2)培养基类型 ②液体培养基 ①合成培养基 将细胞所需的营养物质按照种类和所需量严格配置而成 一、动物细胞培养的条件 2.无菌、无毒的环境 (1)无菌： ①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理 ②在无菌环境下进行操作 定期更换培养液。 (2)无毒： ③添加一定量的抗生素 以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成伤害。 一、动物细胞培养的条件 3.温度、pH和渗透压 (1)温度： (36.5±0.5)℃ 维持细胞正常的形态和功能 (3)渗透压： (2)pH： 7.2～7.4 一、动物细胞培养的条件 4.气体环境 (1)主要有O2和CO2 细胞代谢所必需 维持培养液的pH (2)容器： 通常采用培养皿或松盖培养瓶。 (3)仪器： 置于含有95%空气和5%CO2的混合气体 的CO2培养箱中进行培养。 一、动物细胞培养的条件 动物组织 分散成 单个细胞 培养 1.培养前，为什么要将动物组织分散成单个细胞？ ①分散不会限制彼此的生长和增殖； ②利于从培养液中获得营养，排出代谢废物，利于继续培养。 二、动物细胞培养的过程 根据动物细胞培养的概念，初步构建动物细胞培养的流程： 动物组织 分散成 单个细胞 二、动物细胞培养的过程 培养 根据动物细胞培养的概念，初步构建动物细胞培养的流程： 2.怎样将动物组织分散成单个细胞？ 机械的方法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间。 ①说明动物细胞间的物质主要是什么成分？ 蛋白质 机械法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理 动物组织 分散成 单个细胞 二、动物细胞培养的过程 培养 ②用胃蛋白酶可以吗？ 不可以，因为胃蛋白酶的最适PH为1.5左右 2.怎样将动物组织分散成单个细胞？ 机械的方法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间。 根据动物细胞培养的概念，初步构建动物细胞培养的流程： 机械法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理 动物组织 分散成 单个细胞 二、动物细胞培养的过程 培养 ③胰蛋白酶处理时间过长，会怎样？ 会破坏细胞结构，把细胞消化掉 2.怎样将动物组织分散成单个细胞？ 机械的方法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间。 根据动物细胞培养的概念，初步构建动物细胞培养的流程： 机械法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理 动物组织 分散成 单个细胞 二、动物细胞培养的过程 培养 3.分散成的单个细胞，如何培养？ 用培养液将细胞制成细胞悬液，放入培养皿或培养瓶内，置于适宜环境中培养。 加培养液 细胞悬液 培养 培养皿/瓶 适宜条件 根据动物细胞培养的概念，初步构建动物细胞培养的流程： 机械法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理 二、动物细胞培养的过程 动物组织 分散成 单个细胞 细胞悬液 加培养液 ★4.体外培养动物细胞分类: (1)悬浮生长细胞 细胞能够悬浮在培养液中生长增殖 (2)贴壁生长细胞（主要类型） 细胞需要贴附于某些基质表面才能生长增殖 悬浮培养瓶 培养 机械法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理 培养皿/瓶 适宜条件 细胞贴壁过程 圆球形细胞刚开始 铺展贴壁生长(100×) 培养的动物细胞贴壁生长 并进行有丝分裂(100×) 细胞单层贴壁生长铺满瓶壁后出现接触抑制(100×) 贴壁生长与接触抑制 二、动物细胞培养的过程 动物组织 分散成 单个细胞 细胞悬液 加培养液 ★4.体外培养动物细胞分类: (1)悬浮生长细胞 细胞能够悬浮在培养液中生长增殖 (2)贴壁生长细胞（主要类型） 细胞需要贴附于某些基质表面才能生长增殖 悬浮培养瓶 培养 具有细胞贴壁、接触抑制的现象 机械法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理 培养皿/瓶 适宜条件 二. 动物细胞培养的过程 5.细胞分裂会受阻原因： 悬浮生长 贴壁生长 (大多数) 动物组织 分散成 单个细胞 细胞悬液 加