2.1微生物的实验室培养2 课件-2022-2023学年高二下学期生物人教版选修1

专题2 微生物的培养与应用 课题1 微生物的实验室培养(第2课时) 1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min 2、巴氏消毒法：70-75℃下煮30min或 80℃下煮15min 3、化学药剂消毒法:用75%酒精进行皮肤消毒;氯气消毒水源 4、紫外线30min消毒，照射前，可喷石炭酸或煤酚皂等消毒液加强消毒效果 (1)消毒的方法： 3.常用的消毒与灭菌的方法 一、基础知识 1、灼烧灭菌： 接种环、接种针、试管口、瓶口 2、干热灭菌： 玻璃器皿和金属用具 3、高压蒸汽灭菌： 100kPa、121 ℃下维持15-30min. (2)灭菌的方法： 一、基础知识 1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？ 无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。 思考： 一、基础知识 2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。 （1） 培养细菌用的培养基与培养皿 （2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管 （3） 实验操作者的双手 ——灭菌 ——灭菌 ——消毒。 1. 器具的灭菌 2. 培养基的配制 3. 培养基的灭菌 4. 倒平板 5. 微生物接种 6. 恒温箱中培养 7. 菌种的保存 二、实验操作 (一)制备牛肉膏蛋白胨培养基(用于培养细菌) 牛肉膏蛋白胨固体培养基配方 牛肉膏 5.0g 蛋白胨 10.0g NaCl 5.0g 琼脂 20.0g 将上述物质溶解后，添加自来水，定容至1000mL 二、实验操作 1．计算 2. 称量 3．溶化（注意称量纸） 操作步骤 4．灭菌: 将培养基用玻棒转移至三角锥瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，再放入高压蒸气灭菌锅。 将培养皿用旧报纸包裹，放入干热灭菌箱内，在160～170 ℃下灭菌2h。 二、实验操作 5．倒平板: 待培养基冷却到50 ℃左右时，在酒精灯附近倒平板。 二、实验操作 1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 二、实验操作 3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以防止培养基表面的水分过快挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。 二、实验操作 1、平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面. 在数次画线后,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落. （二）纯化大肠杆菌 微生物接种的方法：最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法 二、实验操作 12 1.为什么每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？ 第一步灼烧接种环：为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物； 第2次到第5次每次划线前灼烧接种环：是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种。使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。 划线结束后灼烧接种环：能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。 二、实验操作 2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？ 以免接种环温度太高，杀死菌种。 3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 二、实验操作 一旦划破，会造成划线不均匀，难以达到分离单菌落的目的； 二是存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落，菌落会沿着划破处生长，会形成一个条状的菌落。 $