3.2 基因工程的基本操作程序（第三课时）-【学生物真有范】2022-2023学年高二生物同步精品备课资源（人教版2019选择性必修3）

03 第三步：将目的基因导入受体细胞 三 第三步：将目的基因导入受体细胞 受体细胞类型 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 农杆菌转化法 花粉管通道法 我国科学家独创 常用 显微注射法 Ca2+处理法 三 第三步：将目的基因导入受体细胞 植物细胞 花粉管通道法 方法一：用微量注射器将含目的基因的DNA 溶液直接注入子房中 含目的基因的DNA 溶液 （我国科学家独创） （我国科学家独创） 三 第三步：将目的基因导入受体细胞 植物细胞 花粉管通道法 方法二：在植物受粉后的一定时间内，剪去柱头，将DNA溶液滴加在花柱切面上，使目的基因借助花粉管通道进入胚囊。 三 第三步：将目的基因导入受体细胞 植物细胞 花粉管通道法 农杆菌转化法 转化： 目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。实质是基因重组。 农杆菌 农杆菌是一种在土壤中生活的微生物，能在自然条件下侵染双子叶植物和裸子植物，而对大多数单子叶植物没有侵染能力。 三 第三步：将目的基因导入受体细胞 植物细胞 花粉管通道法 农杆菌转化法 转化： 目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。实质是基因重组。 农杆菌 农杆菌是一种在土壤中生活的微生物，能在自然条件下侵染双子叶植物和裸子植物，而对大多数单子叶植物没有侵染能力。 Ti质粒 T-DNA （可转移的DNA） 三 第三步：将目的基因导入受体细胞 农杆菌转化法 农杆菌 Ti质粒 T-DNA （可转移的DNA） 目的基因 构建表达载体 含目的基因的 重组 Ti 质粒 转入农杆菌 含重组 Ti 质粒的农杆菌 三 第三步：将目的基因导入受体细胞 农杆菌转化法 农杆菌 Ti质粒 T-DNA （可转移的DNA） 目的基因 构建表达载体 含目的基因的 重组 Ti 质粒 转入农杆菌 含重组 Ti 质粒的农杆菌 导入植物细胞 将目的基因插入 染色体 DNA 中 三 第三步：将目的基因导入受体细胞 农杆菌转化法 农杆菌 Ti质粒 T-DNA （可转移的DNA） 目的基因 构建表达载体 含目的基因的 重组 Ti 质粒 转入农杆菌 含重组 Ti 质粒的农杆菌 导入植物细胞 将目的基因插入 染色体 DNA 中 表现出新性状的植株 三 第三步：将目的基因导入受体细胞 农杆菌转化法 农杆菌 Ti质粒 T-DNA （可转移的DNA） 目的基因 构建表达载体 含目的基因的 重组 Ti 质粒 转入农杆菌 含重组 Ti 质粒的农杆菌 导入植物细胞 将目的基因插入 染色体 DNA 中 第一次拼接 第二次拼接 第一次导入 第二次导入 该过程涉及两次拼接和两次导入，你能总结吗？ 两次拼接：第一次拼接是将目的基因拼接到Ti质粒的T-DNA上；第二次拼接(非人工操作)指被插入目的基因的T-DNA拼接到受体细胞染色体的DNA上。 两次导入：第一次导入是将含目的基因的Ti质粒重新导入农杆菌；第二次导入(非人工操作)是指含目的基因的T-DNA导入受体细胞（非人工操作）。 三 第三步：将目的基因导入受体细胞 根据受体植物的不同，所用的具体转化方法有所区别。 方法一：可以将新鲜的从叶片上取下的圆形小片与农杆菌共培养，然后筛选转化细胞，并再生成植株； 方法二：将花序直接浸没在含有农杆菌的溶液中一段时间，然后培养植株并获得种子，再进行筛选、鉴定等。随着转化方法的突破，用农杆菌侵染水稻、玉米等多种单子叶植物也取得了成功。 受体细胞为受精卵 受体细胞为体细胞 （利用植物细胞的全能性） 目的基因 Ti质粒 表 达 载 体 农杆菌 植物细胞 植物细胞 染色体DNA 新性状植株 构建 转入 导入 插入 表达 农杆菌转化法小结 三 第三步：将目的基因导入受体细胞 三 第三步：将目的基因导入受体细胞 受体细胞类型 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 农杆菌转化法 花粉管通道法 我国科学家独创 常用 显微注射法 Ca2+处理法 三 第三步：将目的基因导入受体细胞 受体细胞类型 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 农杆菌转化法 花粉管通道法 我国科学家独创 常用 显微注射法 Ca2+处理法 三 第三步：将目的基因导入受体细胞 动物细胞 显微注射法 将目的基因导入动物受精卵最常用的一种方法是利用显微注射将目的基因注入动物的受精卵中，这个受精卵将发育成为具有新性状的动物。 三 第三步：将目的基因导入受体细胞 动物细胞 显微注射法 将目的基因导入动物受精卵最常用的一种方法是利用显微注射将目的基因注入动物的受精卵中，这个受精卵将发育成为具有新性状的动物。 受精卵 注射器 固定吸管 显微注射仪 构建基因表达载体并提纯 利用显微注射将基因表达载体注入动物的受精卵中 早期胚胎培养 胚胎移植 获得具有新性状的动物 ①体积大，易操作。②全能性高，易培养成完整个体。 三 第三步：将目的基因导入