内容正文:
微生物的培养技术及应用
第46讲
第十单元 生物技术与工程
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课标解读
1.阐明无菌技术在微生物培养中的应用。
2.概述微生物分离和纯化及测定微生物数量的常用方法。
3.通过配制培养基、灭菌、接种和培养等实验操作获得纯化的酵母菌菌落。
4.分离土壤中分解尿素的细菌,并进行计数。
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内容索引
考点一 微生物的基本培养技术
考点二 微生物的选择培养和计数
真题体验 情景演练
课时精练
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考点一 微生物的基本培养技术
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1.培养基的配制
(1)培养基的概念:人们按照微生物对__________的不同需求,配制出的供其__________的营养基质。
营养物质
生长繁殖
要点梳理
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(2)种类
液体
微生物的运动
活菌计数
天然
合成
选择
抑制或
鉴别
阻止
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(3)成分
各种培养基一般都含有________________________,此外还要满足微生物生长对__________________________的需求。
水、碳源、氮源和无机盐
pH、特殊营养物质以及O2
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2.无菌技术
(1)含义:在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。
(2)常用方法
杂菌污染
温和的物理、化学
所有的微
巴氏消
湿热灭菌
灼烧灭菌
生物
毒法
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(3)常见物品的消毒或灭菌方法
①消毒方法及适用对象
日常食品
牛奶
操作者双手
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②灭菌方法及适用对象
接种工具
金属用具
培养基
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3.微生物的纯培养
(1)概念:由__________繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物,获得__________的过程就是纯培养。
(2)过程:____________、灭菌、接种、______和培养等步骤。
(3)常用方法:__________法和______________法。
单一个体
纯培养物
配制培养基
分离
平板划线
稀释涂布平板
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(4)实例——酵母菌的纯培养
湿热灭菌法
平板划线法
倒置
未接种
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1.培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐,有时还需要加入一些特殊的物质。( )
2.消毒的原则是既杀死材料表面的微生物,又减少消毒剂对细胞的伤害。( )
3.无菌操作的对象只要是没有生物活性的材料(如培养基、接种环等)都可采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。( )
4.平板划线法中每一次划线后要将接种环灼烧。( )
5.为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落。( )
√
√
×
√
×
正误判断
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根据教材选择性必修3 P12“探究·实践”相关内容及图示分析以下问题:
1.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?平板冷凝后,为什么要将平板倒置?
提示:通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面湿度也比较高,将平板倒置,既可以防止培养基表面的水分过快地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。
教材拓展
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2.在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗?为什么?
提示:不能。因为空气中的微生物可能在皿盖和皿底之间的培养基上滋生,可能会造成污染。
3.平板划线法在作第二次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开始划线?目的是什么?
提示:划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,第二次以及其后的划线从上一次划线的末端开始,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。这样做的目的是将聚集的菌种逐步稀释分散以便获得单个菌落。
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1.培养基营养成分的作用和主要来源
核心突破
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2.平板划线操作的注意事项
(1)灼烧接种环,待其冷却后才能伸入菌液,以免温度太高杀死菌种。
(2)第二次及其以后的划线操作总是从上一次划线末端开始,能使微生物的数目随着划线次数的增加而逐渐减少,最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
(3)划线时最后一区不要与第一区相连。
(4)划线时用力大小要适当,避免用力过大将培养基划破。
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(5)操作第一步即取菌种之前以及每次划线之前都需要将接种环进行火焰灼烧灭菌,划线操作结束时,仍需灼烧接种环,每次灼烧的目的如下表:
第一次操作 每次划线之前 划线结束
目的 杀死接种环上原有的微生物 杀死上次划线后接种环上残留的菌种,使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端,使每次划线菌种数目减少 杀死接种环上残存的菌种,避免微生物污染环境和感染操作者
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考向一 培养基的成分、作用和配制
1.(2022·大连期末)下列有关微生物培养基种类及配制原则的表述,正确的是(不定项)
A.任何培养基都必须含有碳源、氮源、水、无机盐及生长因子
B.液体培养基可用于观察菌落,固体培养基可用于工业生产
C.培养霉菌时需将培养基pH调到中