内容正文:
第2节 微生物的培养技术及应用
一 生物的基本培养技术(第2课时)
第1章 发酵工程
1
1.相关概念
①培养物:
②纯培养物:
③纯培养:
获得 的过程。
一.微生物的纯培养
在微生物学中,将接种于 内,在合适条件下形成的
含 的群体。
由 所获得的微生物群体。
纯培养物
培养基
特定种类微生物
单一个体繁殖
2.纯培养的步骤步骤: → → → 。
配置培养基
灭菌
接种
分离和培养
3.菌落
①概念:分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体,这就是菌落。
②获得单菌落的方法:
平板划线法
③原理:
微生物群
繁殖
单个菌落
分散或稀释
单个细胞
2、方法: 和 。
稀释涂布平板法
P11
(P11)
03
【探究 实践】
酵母菌的纯培养
接种和分离酵母菌
培养酵母菌
灭菌
倒平板
配制培养基
制备培养基
P12
03
酵母菌的纯培养
①配制培养基
灭菌之前先调PH
1.制备培养基
P12
03
②灭菌
培养基
高压蒸汽灭菌锅
培养皿
干热灭菌箱
100kPa 121℃ 15~30分钟
160~170℃ 2h
1.制备培养基
P12
1.将马铃薯去皮切块,加水煮沸一定时间,过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量的蔗糖和琼脂,用水定容后灭菌,得到M 培养基。下列有关叙述错误的是( )A.若M培养基中加入青霉素,可用于真菌的筛选
随堂练习
B
青霉素可抑制细菌生长,筛选出真菌
B.制备培养细菌的培养基时,应将pH调至酸性
C.M培养基中的马铃薯浸出液可为微生物提供无机盐
D.倒平板时,应将皿盖打开一条稍大于瓶口的缝隙
M培养基中的马铃薯浸出液可为微生物提供碳源、氮源、无机盐等
培养霉菌的培养基时,应将pH调至酸性
中性或弱碱性
待培养基冷却到50℃左右时,在酒精灯火焰附近倒平板
温度过高易烫伤,过低培养基会凝固
防止皿盖上的冷凝水珠落入培养基,造成污染
避免周围环境中微生物的污染
1.制备培养基
③倒平板
灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基
P12
2.下列关于倒平板的叙述,错误的是( )
A.待培养基冷却至50 ℃左右时倒平板
B.倒平板整个过程应在酒精灯火焰旁进行
C.完全打开培养皿皿盖,右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿,左手立
即盖上培养皿的皿盖
D.为避免水滴滴入培养基,平板应倒过来放置
C
随堂练习
应是用拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,而不是完全打开皿盖,目的是防止杂菌污染
①灼烧接种环,直至接种环金属丝烧红
⑥在火焰附近将皿盖打开一条缝隙,用接种环在培养基表面迅速划3-5条平行线,盖上皿盖。
⑤试管口通过火焰,并塞上棉塞
②在火焰旁冷却接种环,拔出酵母菌培养液试管的棉塞
③试管口通过火焰
④在火焰附近用接种环蘸取一环菌液
⑦灼烧接种环,待其冷却后,从第一次划线的末端开始作第二次划线。重复以上操作,作第三、四、五次划线。
注意:不要将最后一次划线与第一次的划线相连
灭菌
无菌环境
防止高温使菌种死亡
灭菌
无菌环境
2.接种和分离酵母菌
P12
1
2
3
4
5
【平板划线法注意事项】
1.接种环只蘸一次菌液,但要在培养基不同位置连续划线多次;
2.划线首尾不能相接;
3.每次划线前灼烧接种环进行灭菌;
4.划线操作结束后,仍需灼烧接种环。
连续划线法
分区划线法
思考分析:
1.总共蘸取了几次菌液?
2.为什么要多次灼烧接种环?
1次
灼烧时期 目的
①取菌种前
②每次划线前
③接种结束后
杀死接种环上原有的微生物
杀死上次划线时残留菌种,使下一次划线的菌种直接来源上次划线的末端。从而通过划线次数的增加,每次划线时菌种的数量逐渐减少,以便得到单个菌落。
杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者
3.如图所示,接种环共需灼烧几次?
6次
思考分析:
3.在灼烧接种环之后,要等其冷却后再进行划线的原因?
4.在第二次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开始划线?
5.为什么最后一次划线与第一次的划线不能相连?
6.你觉得要接种多少个平板才合适?
以免接种环温度太高,杀死菌种
使下一次划线的菌种直接来源上次划线的末端。从而通过划线次数的增加,每次划线时菌种的数量逐渐减少,以便得到单个菌落
如果与