内容正文:
2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体
高二生物组
授课人:符淑乾
(1)
(1)
(2)
(3)
(4)
(5)
请描述植物体细胞杂交过程
复习旧知识:
两不同的动物细胞能否发生融合?
动物细胞融合(也称细胞杂交):是指两个或多个细胞融合形成一个单核细胞的过程。
一、动物细胞融合
概念:
【学习活动1】简述动物细胞融合的过程
多个两种细胞放在一起
灭活的病毒诱导?
两个细胞核融合
杂交细胞:含两种生物的遗传物质
原理:
细胞膜具有流动性
1.灭活的病毒为什么能作为诱导剂?能否用不灭活的病毒能作为诱导剂,为什么?
2.简述动物细胞融合的意义?
根据动物细胞融合过程,思考并讨论以下问题:
克服了远缘杂交不亲和的障碍
因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合。
不能,因为不灭活的病毒会感染细胞。
【学习活动2】植物细胞杂交与动物细胞融合的不同
比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合
原理
融合前处理
使用的酶
诱导方法
主要用途
细胞膜的流动性细胞的全能性
细胞膜的流动性
纤维素酶、果胶酶
胰蛋白酶
物理方法
(离心、振荡、电激)
化学方法(PEG)
物理、化学方法
灭活的病毒
获得杂种植株
制备单克隆抗体
去除细胞壁后诱导原生质体融合
使细胞分散后诱导细胞融合
动物细胞融合的应用:
最重要的用途是制备单克隆抗体
单个B淋巴细胞克隆产生的化学性质单一
特异性强的抗体
描述制备抗体的传统方法:
向动物体内反复注射某种抗原
该法制备抗体的特点:
产量低、纯度低、特异性差
问题:如何大量生产单克隆抗体?请尝试设计一个方案。
提示1:对B细胞进行细胞培养可行吗?
提示2:我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的?
一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体
骨髓瘤细胞能无限增殖
杂交瘤细胞
动物细胞培养技术
设计方案:
动物细胞融合技术
单克隆抗体
既能产生特异性抗体, 又能无限增殖的细胞
1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验
【学习活动二】模型 模拟单克隆抗体的制备过程
材料用具:
骨髓瘤细胞
免疫小鼠
单克隆抗体
筛选1
克隆、筛选2
体内培养
已免疫过的B淋巴细胞(浆细胞)
(选择性培养基)
(抗体检测)
杂交瘤细胞
原理:
细胞膜具有一定的流动性和细胞增殖
单克隆抗体的制备过程
细胞融合
杂交细胞
体外培养
注射特定的抗原蛋白
技术:
动物细胞融合、动物细胞培养
特点:特异性强、灵敏度高
单克隆抗体的应用
(1)作为诊断试剂——最广泛应用
准确、高效、简易、快速
(如同位素标记单克隆抗体,可诊断肿瘤、心血管畸形等)
(2)运载药物
生物导弹=单克隆抗体+药物,治疗肿瘤)
(“生物导弹” —单抗导向,药物为弹头)
既不损伤正常细胞,又减少了用药剂量。
单克隆抗体的应用
(1)若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞,则B细胞是取自小鼠体内的 细胞,从小鼠体内提取分离该细胞之前,应给小鼠注射_____________类物质。
(2)d过程是一个_____________过程,该过程的进行常用_____________或_____________的诱导。
(3)假设仅考虑某两个细胞的融合,则可形成 种类型的C细胞,因此需用__________培养基筛选出D细胞用于培养,D细胞的名称是 ,其特点是_________________________________________。
效应B
抗原
细胞融合
聚乙二醇 灭活的病毒
选择性
3
既能无限增殖又能产生特异性抗体
杂交瘤细胞
学以致用
(4)在培养时通过________分裂方式大量繁殖。D细胞体外培养需要注意的条件是(要求答5项)__________________________________。
(5)单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面,与常规抗体相比,其特________________。
特异性强、灵敏度高
有丝
无菌、无毒的环境;充足的营养;适宜的温度和pH;适宜的气体环境
学以致用
课堂小结
动物细胞融合:
过程:
原理:
方法:
单克隆抗体:
应用
应用:
原理:
过程:
细胞膜的流动性、细胞增殖
免疫处理、细胞融合
两次筛选
培养杂交瘤细胞
细胞膜的流动性
诱导融合、筛选
物理法、化学法、灭活的病毒
2.科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合,得到杂交细胞,经培养可产生大量的单克隆抗体,与骨髓瘤细胞融合的是( )
A.经过免疫的B淋巴细胞 B.没经过免疫的T淋巴细