内容正文:
2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体
核心素养目标
1.掌握动物细胞融合技术及应用。(重点)
2.简述单克隆抗体的制备。(重、难点)
植物体细胞杂交过程:
植物细胞A
植物细胞B
去除细胞壁
去除细胞壁
原生质体A
原生质体B
诱导融合
杂合的原生质体
再生出细胞壁
杂种细胞
细胞分裂(脱分化)
分化发育(再分化)
愈伤组织
杂种植株
原生质体的制备
原生质体的融合
筛选
组织培养
如果将奶牛的细胞与植物细胞杂交,得到绿色的小奶牛,那岂不是只要晒晒太阳就可以挤出牛奶吗?
思考1:动植物细胞融合有何区别?基本原理和过程是否相同?
(1)区别:植物细胞要去除细胞壁;动物细胞全能性受限制,不能培育出杂种个体。
(2)基本原理:细胞膜的流动性
A细胞
B细胞
人工诱导
杂交细胞
动物细胞融合(也称细胞杂交):是指 融合形成 的过程。
一、动物细胞融合
两个或多个细胞
一个细胞
1.概念
杂交细胞:融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞。
病毒颗粒黏 附细胞表面
诱导
方法
物理法:
化学法:
生物法:
灭活的病毒
离心、振动、电激
聚乙二醇(PEG)
2.诱导方法
细胞A
细胞B
杂种细胞
1、为什么可以用灭活的病毒?
灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力,但是并不破坏这些病原体的抗原结构
灭活的病毒表面含有的糖蛋白和一些酶 能与细胞膜上糖蛋白发生作用、使细胞相互凝集、细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合.
病毒颗粒黏 附细胞表面
诱导
方法
物理法:
化学法:
生物法:
灭活的病毒
离心、振动、电激
聚乙二醇(PEG)
2.诱导方法
细胞A
细胞B
杂种细胞
1、为什么可以用灭活的病毒?
2、病毒不灭活可以吗?
不灭活会感染细胞,而不能诱导细胞融合。
病毒颗粒黏 附细胞表面
诱导
方法
物理法:
化学法:
生物法:
灭活的病毒
离心、振动、电激
聚乙二醇(PEG)
2.诱导方法
细胞A
细胞B
杂种细胞
1、为什么可以用灭活的病毒?
2、病毒不灭活可以吗?
不灭活会感染细胞,而不能诱导细胞融合。
原理:细胞膜具有流动性(结构特点),病毒的侵染能力
4.融合过程
细胞膜融合
细胞质融合
细胞核融合
细胞融合完成的标志:
细胞核融合成一个核
动物细胞融合过程
不同DNA的两个细胞
灭活的病毒
有丝分裂
两个完整的杂交细胞
三种AA、AB、BB(A、B)
含两种生物的遗传物质
融合后细胞的类型(只考虑俩俩融合)
A细胞
B细胞
融合后的细胞进行有丝分裂,形成完整的杂交细胞
3.动物细胞融合技术的意义和应用
突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能
成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。
①意义:
②应用:
制备单克隆抗体(最主要的应用)
4.比较植物体细胞杂交和动物细胞融合
比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合
原 理
融合前处理
诱导方法
用 途
细胞膜的流动性、
植物细胞的全能性
细胞膜的流动性
用纤维素酶、果胶酶去壁
用胰蛋白酶使细胞分散
物理、化学方法
物理、化学、
灭活的病毒
完整植株
主要用于制备单克隆抗体
小牛试刀
1.能使动物细胞融合的特有的诱导因子是( )
A. 离心 B. 灭活的病毒 C. 电刺激 D. 振动
2、融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点?( )
A.具有原来两个或多个细胞的遗传信息
B.能无限增殖
C.可形成新个体 D.培养过程会贴壁
3、动物细胞融合的目的中最重要的是( )
A.克服远源杂交不亲和 B.制备单克隆抗体
C.培育新物种 D.生产杂种细胞
B
A
B
二、单克隆抗体
抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。
什么是抗体?传统的获取抗体的途径是什么?
1.抗体的传统生产方法
从血清中分离抗体
该法制备抗体的缺点:
产量低、纯度低,且抗体的特异性差、灵敏度低。
多种效应B细胞
动物体内
多种抗体
抗原
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1、抗体是由何种细胞产生的?
2、一个B淋巴细胞能产生多种抗体吗?
3.要想获得大量的单一抗体怎么做?
每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体
思考:
效应B细胞
1、单克隆抗体的概念
是用单个B淋巴细胞进行克隆,得到的一种化学性质单一、特异性强的抗体
单克隆细胞:单个细胞增殖形成的细胞群
思考在体外培养的条件下,一个B淋巴细胞有没有可能无限增殖?什么细胞具