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常考大题一题8练(5)】
生物技术与工程A组
(限时25分钟,满分40分)
1.(10分)CRISPR/Cas9系统由向导RNA和Cas9
蛋白组成,由向导RNA(gRNA)引导Cas9蛋白在
(2)研究发现,基于体细胞核的动物克隆雅度高于
特定的基因位点进行切割来完成基因的编辑过
基于胚胎细胞核的动物克隆,原因是
程。用基因编辑技术将病毒外壳蛋白基因导入猪
细胞中,然后通过核移植技术培育基因编辑猪,可
为获得更多基因编辑猪,可在胚胎移植前对胚胎
用于生产基因工程疫苗。如图为基因编辑猪的培
进行
,此操作的对象是囊胚时需要特别
育流程。回答下列问题:
注意的是
,该操作技术所需要
的主要仪器、设备是
(3)基因编辑前,采集2号猪的组织块,用
5
处理获得分散的成纤维细胞,放置于
3
靶基因
Cas9
37℃的CO2培养箱中培养,C)2的作用是
甲
收集卵母细胞
2.(10分)研究表明,艾叶煎液具有抗细菌和抗真菌
去核
1号
的作用。为研究艾叶煎液对大肠杆菌、金黄色葡
Q
基因
萄球菌、黑曲霉菌的抑菌能力,科研人员将若干浸
显微注射
2号
泡了艾叶煎液的无菌圆纸片贴在分别培养三种菌
、移植,
的平板上,然后将平板置于恒温培养箱中进行培
4号
养,一段时间后,测量抑菌圈直径并求平均值,结
(1)由于Cas9蛋白没有特异性,用CRISPR/Cas9
果如表所示。回答下列问题:
系统切割靶基因时,向导RNA的识别序列应具有
金黄色葡
的特点是
若向导
大肠杆箱
黑曲霉菌
萄球闲
RNA为5'-UCCACAAUC-3',则向导RNA识
抑菊陶直
7.79
8.93
0
别的基因靶序列为5'一
-3′.
径/mm
CRISRP/Cas9基因编辑技术有时会出现定位错
(1)可用
法将菌液接种在固体
误造成脱靶。通常,向导RNA的碱基序列越短脱
培养基上,使微生物均匀分布在平板上,该接种方
靶率越高,原因是
法还可以用来计数,但统计的菌落数往往比活菌
生物学专项提分卷(新教材)第61页(共74页)
的实际数目
(填“多”或“少”),原因是
(1)提取油菜细胞中的总DNA,根据PEP基因上
游及下游的碱基序列设计引物,通过PCR扩增
PEP基因。在PCR过程中,引物是
酶
的结合位点,也是子链延伸的起点。为方便构建
(2)置于培养箱中培养的平板需要
(填
PEP反义基因,一般将限制酶的识别序列设计在
“倒置”或“正置”),目的是
引物上,图乙中PEP基因上游引物中引人
的识别序列,下游引物中引入
的
识别序列。
(3)实验结果说明艾叶煎液对
(2)质粒上的np1Ⅱ为新霉素抗性基因,g4s基因
的抑制作用最明显。为使实验更具说服力,对照
控制合成的酶能使?葡萄糖苷酸水解为蓝色物
组的处理是
质。将用限制酶处理后的质粒和PEP反义基因
混合,加人T4DNA连接酶连接,再与农杆菌菌液
温育一段时间后,涂布到含有新霉素和?葡萄糖
苷酸的平板上,一段时间后,在平板上长出白色和
(4)使用后的培养基在丢弃前要经过
蓝色两种菌落,其中符合要求的是
,理由
处理。
是
3.(10分)丙酮酸羧化酶(PEP)是控制油菜中蛋白质
与油脂比例的关键酶。通过构建PEP基因的反
(3)农杆菌在侵染油菜细胞后,可将质粒上的
义基因(将PEP基因反向连接在启动子之后,下
区域转移并整合到油菜细胞的基因组中,进
称PEP反义基因,此基因在转录时的模板链为
而稳定遗传。PEP反义基因可有效抑制PEP基
PEP基因模板链的互补链),抑制PEP基因的表
因的表达,推测其原理是
达,可提高油菜籽中的油脂含量。图甲为质粒的
构成组件,图乙为PEP基因结构的示意图。回答
下列问题:
复制原点
T-DNA右边界
启动子1
一-Ⅱ基因
一终止子
质粒
少一启动子2
BamH I
上游
下游
gs基因
PEP基因
T-DNA左边界锋止子
乙
生物学专项提分卷(新教材)第62页(共74页)
4.(10分)科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得(3)植物原生质体融合过程常利用化学试剂
了番茄一马铃薯杂种植株,为了便于杂种细胞的诱导,在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观
筛选和鉴定。科学家利用红色荧光和绿色荧光分察。根据细胞膜表面的荧光可观察到种
别标记番茄和马铃薯原生质体膜上的蛋白质,其不同的原生质体(只考虑细胞两两融合的情况),
培育过程如图所示。请据图回答下列问题:当观察到___时
可判断该原生质体是由番茄原生质体和马铃薯原
盒进盒的。生质体融合而成的。
料细胞__(4)过程④中的培养基常添加的植物激素是
愈伤组织_________.
(1)过程①常用的酶是____.(5)若番茄细胞内有m条染色体,马铃薯细胞内有
n条染色体,则番茄一马铃薯细胞在有丝分裂后期
细胞融合完成的标志是______含__条