内容正文:
第32讲 微生物的培养技术与应用
1.阐明在发酵工程中灭菌是获得纯净的微生物培养物的前提。2.阐明无菌技术是在操作过程中,保持无菌物品与无菌区域不被微生物污染的技术。3.举例说明通过调整培养基的配方可有目的地培养某种微生物。4.概述平板划线法和稀释涂布平板法是实验室中进行微生物分离和纯化的常用方法。5.概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法。
考点一 微生物的培养技术
1.微生物类群
2.培养基
(1)概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。
(2)作用:培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。
(3)分类
划分标准
种类
特点
用途
物理性质
液体培养基
不加凝固剂
工业生产、扩大培养
半固体
加凝固剂如琼脂
观察微生物的运动、分类、鉴定
固体
微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种
化学成分
天然
含化学成分不明确的天然物质
工业生产
合成
培养基成分明确
分类、鉴定
用途
选择
在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物生长,促进需要的微生物生长
培养、分离出特定微生物
鉴别
在培养基中加入某种指示剂或化学药品,用以鉴别不同种类微生物
鉴别不同种类微生物
(4)成分:能够为微生物提供营养物质
3.无菌技术
(1)概念:在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。
(2)包括:消毒和灭菌
①概念及方法
②注意事项
避免已经灭菌的材料用具与周围物品接触。为了避免周围环境中微生物的污染,操作应在超净工作台上并在酒精灯火焰旁进行。
(选择性必修3 P20“拓展应用2”)已知刚果红是一种染料,它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物,但并不与水解后的纤维二糖、葡萄糖等发生这种反应。当我们在含有纤维素的培养基中加入刚果红时,刚果红与纤维素形成红色复合物;而当纤维素被纤维素分解菌分解后,复合物就无法形成,培养基中会出现以这些菌为中心的透明圈。可用于分离、鉴别纤维素分解菌。
(选择性必修3 P10“旁栏思考”)培养基中的氮元素是微生物合成蛋白质、核酸等物质所必需的,所以培养基需要氮源。
(选择性必修3 P10“相关信息”)生物消毒法是指利用生物或其代谢物除去环境中的部分微生物的方法。
1.芽孢是有些细菌在一定条件下,细胞里面形成一个椭圆形的休眠体,有很强的抵抗力。
2.孢子是细菌、原生动物、真菌和植物等产生的一种有繁殖作用的无性生殖细胞,能直接发育成新个体。
3.使用后的培养基必须灭菌才能丢弃,以免污染环境。
(选择性必修3 P14“概念检测”)日常生活中保存食品的方法有干制、腌制、低温储存等。干制可以降低食品的水分含量;腌制可以通过食盐、糖等制造高渗环境,从而抑制微生物的生长和繁殖;低温则是通过降低微生物的代谢速率来抑制微生物的生长和繁殖。
题型一 培养基的成分及配制
1.关于培养基的配制说法不正确的是( )
A.在配制培养乳酸杆菌的培养基时,需加入维生素
B.微生物的适应性强,配制培养基时可以不考虑pH
C.虽然各种培养基的具体配方不同,但一般都含有碳源、氮源、水和无机盐
D.配制培养基时要注意各种养分的浓度和比例
答案 B
2.(2022·湖北协作体联考)下表为某培养基的配方,有关叙述正确的是( )
成分
牛肉膏
葡萄糖
K2HPO4
琼脂
蒸馏水
含量
10 g
10 g
2 g
适量
定容至1000 mL
A.从物理性质看,该培养基属于液体培养基
B.该培养基中提供碳源的物质主要是葡萄糖,提供氮源的物质是牛肉膏
C.能在此培养基上生长的只有大肠杆菌
D.该培养基调节合适的pH后就可以接种使用
答案 B
解析 该培养基含有琼脂,从物理性质看,该培养基属于固体培养基,A错误;该培养基中提供碳源的物质主要是葡萄糖,提供氮源的物质是牛肉膏,B正确;很多微生物都能利用葡萄糖,此培养基中能生长多种微生物,不是只有大肠杆菌,C错误;该培养基调节合适的pH后要进行高压蒸汽灭菌操作,D错误。
1.培养基的配制原则
(1)目的要明确:配制时应根据微生物的种类、培养目的等确定配制的培养基种类。
(2)营养要协调:注意各种营养物质的浓度和比例。
(3)pH要适宜:培养不同微生物所需的pH不同。
2.培养基中营养物质的确定方法
不同种类的微生物代谢特点不同,因此对培养基中营养物质的需求也不同。如:
(1)自养型微生物所需的主要营养物质是无机盐,碳源可来自大气中的CO2,氮源可由含氮无机盐提供。
(2)异养型微生物所需的营养物质主要是有机物,碳源必须由含碳有机物提供,氮源也主要是由有机物提供,部分异养型微生物也可以利用无机氮源。
题型二 无菌技术
3.在科研和生产上,研究和