内容正文:
第二章 细胞工程
第1课时:植物细胞工程的基本技术
第1节 植物细胞工程
人教版(2019)生物选择性必修3
学习目标:
1.简述植物组织培养技术的原理和过程。
2.结合具体实验,尝试设计植物组织培养技术的流程简图。
3.了解植物组织培养技术已取得的进展和尚未解决的问题,认同科学是一个不断发展的过程。
咏怀
兰为王者香,芬馥清风里。
从来岩穴姿,不竞繁华美。
植物组织培养技术
思考:高洁、典雅的兰花颇受人喜欢。但其繁殖率低,价格不菲,如何让它大量、快速地繁殖呢?
一、新课导入
细胞工程是指应用细胞生物学、分子生物学和发育生物学等多学科的原理和方法,通过细胞器、细胞或组织水平上的操作,有目的地获得细胞、组织、器官、个体或其产品的一门综合性的生物工程。
动物细胞工程
植物细胞工程
植物组织培养
植物体细胞杂交
二、细胞工程
原理
操作
水平
目的
植物组织培养技术
植物细胞工程的基本技术
PART ONE
三、植物组织培养技术
是指将离体的植物器官、组织或细胞等,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其形成完整植株的技术。
植物细胞的全能性
原理:
生殖方式:
无性生殖
分裂方式:
有丝分裂
地位:
植物细胞工程的基本技术
1.概念
2.细胞的全能性
每一个细胞含有控制该生物发育的全部基因(全套遗传信息)
(1)生殖细胞>体细胞(如:受精卵/早期胚胎/分生组织)
(2)植物细胞>动物细胞
(3)分化程度越高,全能性越低(如:B细胞/记忆细胞/浆细胞)
比较:
生物体内细胞并不都表现全能性
原因:
原因:在特定的时间和空间条件下,细胞中的基因会选择性表达。
细胞经过分裂和分化后,仍然具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能。
如何才能让细胞表现出全能性?
未分化的细胞也具有全能性
自主阅读教材35页—36页,小组思考并讨论以下问题:
1.概述植物组织培养的基本过程?
2.决定植物脱分化、再分化的关键因素是什么?
3.在组织培养实验中,为什么要强调所用器械的灭菌和实验人员的无菌操作?
四、植物组织培养技术
(1)基本流程
探究·实践 菊花的组织培养
3.植物组织培养的流程
接种外植体
愈伤组织
诱导生芽
诱导生根
移栽成活
脱分化
再分化
(2)方法步骤
①制备外植体
消毒:
切割:无菌操作
酒精
30s
无菌水
2-3次
次氯酸钠溶液
30min
材料:
幼嫩的菊花茎段
2-3次
无菌水洗
目的:防止杂菌生长。一方面与培养物竞争营养;另一方面产生有害物质危害培养物。
探究·实践 菊花的组织培养
3.植物组织培养的流程
思考:在组织培养实验中,为什么要强调所用器械的灭菌和实验人员的无菌操作?
②接种到诱导愈伤组织培养基
脱分化(避光)
产生愈伤组织
思考:该过程是否涉及细胞分裂、细胞分化?愈伤组织的代谢类型是什么?为什么诱导愈伤组织的过程中应避光培养?
超净工作台无菌操作
脱分化:
已分化细胞,失去其特有结构和功能而转变成未分化的细胞的过程。
注意:过程中涉及的生命活动只有细胞增殖(有丝分裂),没有细胞分化。该培养过程一般不需要光照
代谢类型:异养需氧型
有光时,往往容易形成维管组织,而不易形成愈伤组织。
愈伤组织:
细胞排列疏松且无规则、高度液泡化、不定形的薄壁组织团块。
诱导生根
诱导生芽
④接种到诱导生根培养基
③接种到诱导生芽培养基
再分化:
愈伤组织在培养过程中重新分化根或芽等器官的过程。
注意:过程中涉及的生命活动:既有细胞增殖(有丝分裂),又有细胞分化。需要给予适当光照,诱导叶绿素的合成,使试管苗能够进行光合作用。
再分化(需光)
思考:该过程是否涉及细胞分裂、细胞分化?光照的作用是什么?
⑤移栽
培养室
移栽前先打开封口膜或瓶盖,让试管苗在培养箱内生长几日。用流水清洗掉根部的培养基后,将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中,待其长壮后再移栽入土。每天观察并记录幼苗的生长情况,适时浇水、施肥,直至开花。
植物激素的作用是什么?决定植物脱分化、再分化的关键因素?
生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素。它们的浓度、比例都会影响植物细胞的发育方向。
巧记:高根低芽中愈伤
取决于植物激素的种类及配比。主要是生长素和细胞分裂素。
愈伤组织
愈伤组织
胚状体
生芽
生根
对照
细胞分裂素多
生长素少
细胞分裂素少生长素多
细胞分裂素和生长素比例适中
细胞分裂素中等量,生长素少
思考与讨论:
① 接种3-4d后,检查外植体的生长情况,统计有多少外植体被污染,试分析它们被污染的可能原因。
培养基、接种工具灭菌不彻底;
外植体消毒不彻底;
操作过程不符合无菌操作要求