内容正文:
基因工程的基本操作程序
转基因食品是如何培育出来的呢?
基因工程!!
基因工程的基本操作程序
1、目的基因的获取
2、基因表达载体的构建
3、将目的基因导入受体细胞
4、目的基因的检测与鉴定
一、目的基因的获取
1.目的基因的概念:主要是 编码蛋白质的结构基因,也可以是一些具有调控作用的因子
3.目的基因的来源:可以从 分离出来,
也可以
4.目的基因的获取方法:(1)
(2)
(3)
2.目的基因的结构:
启动子
RNA聚合酶结合位点
基因
非编码区
编码区
非编码区
mRNA
蛋白质(多肽链)
起始密码子
终止密码子
DNA双链
终止子
原核细胞的基因结构
注:非编码区不编码蛋白质,但是调控遗传信息表达,上游有RNA聚合酶结合位点(启动子)。
DNA双链
非编码区
非编码区
编码区
RNA聚合酶结合位点
前体mRNA
蛋白质(多肽链)
基因
外显子
内含子
成熟mRNA
加工
起始密码子
终止密码子
1 2 3 4
1 2 3 4
注:外显子数目=内含子数目+1
真核细胞的基因结构
原核细胞与真核细胞的基因结构比较
原核细胞 真核细胞
不同点 编码区是_____
的,边_________边_________ 编码区是间隔的、
_____的,先_____后_____
相同点 都由能够编码蛋白质的______和具有调控作用的______区组成的
连续
不连续
编码区
非编码
转录
翻译
转录
翻译
科学工作者分离得到了某原核生物基因,并将其解离成两条单链。现让其中一条链与由该基因转录而来的信使RNA杂交配对,结果如图所示。
非编码区
非编码区
编码区
mRNA
基因的一条链
A
B
C
真核生物基因的有关实验
成熟mRNA
对应基因的一条链
编码区
非编码区
非编码区
A
B
C
一、目的基因的获取
2.目的基因的结构:
编码区
非编码区
原核生物:编码合成mRNA,进而编码蛋白质的合成
真核生物:
外显子:
内含子
编码成熟mRNA,进而编码蛋白质的合成
启动子
位置:
功能:
RNA聚合酶识别和结合的部位,驱动基因转录。
基因的首端(一段有特殊结构的DNA片段)
终止子
位置:
功能:
位于基因的尾端(一段特殊的DNA片断)
终止mRNA的转录
一、目的基因的获取
1.目的基因的概念:主要是 编码蛋白质的结构基因,也可以是一些具有调控作用的因子
3.目的基因的来源:可以从 分离出来,
也可以
4.目的基因的获取方法:(1)
(2)
(3)
2.目的基因的结构:
自然界已有的物种中
用人工的方法合成
从基因文库中获取
利用PCR技术扩增目的基因
人工合成
3.目的基因的获取方法:
(1)从基因文库中获取目的基因
基因文库概念
将含有某种生物不同基因的许多DNA片段,导入受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同基因,称为基因文库。
基因文库的种类
部分基因文库:只包含了一种生物的部分基因, 如:cDNA文库
基因组文库:含有一种生物的全部基因
基因文库的构建
对于真核生物,
从基因文库中选出的目的基因包含编码区和非编码区(启动子和终止子)
从cDNA文库中选出的目的基因只包含编码区的外显子
基因组文库与cDNA文库的比较
文库类型 cDNA文库 基因组文库
基因多少
文库大小
启动子
内含子
物种间的基因交流
某种生物部分基因
某种生物全部基因
小
大
无
有
无
有
可以
部分基因可以
村长, 为什么要构建基因文库?直接从含有目的基因的生物中提取不行吗???
当然行啊。构建基因文库只是获取目的基因的方法之一。但是,有时我们完全不知道目的基因序列,或者想从一种生物体内获得许多基因,或者想知道几种生物之间有哪些基因不同,或者想知道一种生物在不同的发育阶段都表达哪些基因,或者想得到一种生物的全部基因序列,往往就需要构建基因文库。
④构建基因文库的目的
基因文库构建好了,怎么从中得到我们所需的目的基因呢???
目前来说,这还是一件比较复杂的。事情,简单的说就是根据目的基因的相关信息,如基因的核苷酸序列、