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二轮生物不定项版
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考点3
基因工程
脉络梳理连点成网
知识脉络
基因工程的操作对象是DNA分子,利用限制酶、DNA连接酶、载体等进行
基因工程的操作,基因工程在农牧业、医药卫生、食品工业等方面有广泛的应用,
在基因工程的基础上,崛起了第二代基因工程一蛋白质工程。
父知识网络对照课本回顾主干知识)
黏性末端一
日的基因的
可产生
分子手
赏用的扩增方法,PCR
术刀:
馆选与获取
平末端
限制酶
用限制,分别切割载体
F.coli DNA
·和含行目的基因的DNA
分子缝
连接酶
基因表
片段
主要有合针:
基本
基
达载体
步界
T4DNA
DNA连
工具
的构建
接再
本
DNA连接藓连接形成重
连接酶
组DNA分子
质粒,常用
分子运输车:载体一
工程
作程序
植物细胞:花粉管通道
将日的常用
法,衣杆菌转化法
基因导方法
·动物细胞:显微注射法
受体
细胞
应用
一微生物细慰:G转化法
分子水平:检测DNA
日的基因
包括一
mRNA,蛋白质
的检闲与
蛋白质工程·
鉴定
·个休水平
重要概念优化检测
重要概念1基因工程是一种重组DNA技术
[例1](2020北京等级考)为了对重金属污染的土壤进行生物修复,研究者将
从杨树中克隆的重金属转运蛋白MA3)基因与外源高效启动子连接,导入杨树基
因组中(如图)。
杨树内左边界
D
右边界杨树内
源DNA
启动子M43基因终止子
nXA
(注:①、②、③.④表示引物】
为检测获得的转基因杨树苗中是否含有导入的HMA3基因,同时避免内源
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HMA3基因的干扰,在进行PCR扩增时,应选择的引物组合是()
A.①+③B.①+②
C.③+②D.③+④
答案B
解析PCR扩增时,由于子链延伸方向为5端到3’端,因此应在模板DNA
两条链的3′端分别设计一个引物,A错误;为了对重金属污染的土壤进行生物修
复,研究者扩增获得的DNA片段只要既包含外源高效启动子序列又包含HMA3
基因的序列,便可在检测是否有HMA3基因的同时,又可排除内源HMA3基因的
干扰,若用③+②或③+④引物组合进行PCR扩增,扩增获得的HMA3基因不
包含外源高效启动子序列,C、D错误;若用①+②或①+④引物组合进行PCR
扩增,获得的DNA片段符合要求,B正确。
[例2](2022·北京海淀期末)乳酸乙酯是白酒中重要的呈香物质,由乳酸脱氢
酶催化产生,影响白酒品质和风格。科研人员将酿酒酵母质粒上的丙酮酸脱氢酶
基因(PD)替换为植物乳杆菌中的乳酸脱氢酶基因(L-PG),可获得乳酸乙酯高产
菌株,该过程如图所示。下列关于该过程的分析不合理的是()
复制原点P区p′复制原点PB′
A.转入的L-PG基因表达产物不能影响酿酒酵母活性
B.可以利用PCR技术筛选含有L-PG基因的受体细胞
C.通过同源重组实现酵母菌的PD基因被替换为L-PG基因
D.标记基因Amp′可检测是否成功构建乳酸乙酯高产菌株
答案D
解析酿酒酵母质粒上的PD基因替换为L-PG基因前后,标记基因Amp
′均正常,故标记基因Amp′不能检测是否成功构建乳酸乙酯高产菌株。
[例3](不定项)下列关于生物工程中常见的叙述,正确的是()
A.DNA连接酶可把目的基因与载体的黏性末端的碱基黏合,形成重组DNA
B.限制性内切核酸酶将一个DNA分子片段切成两个片段需消耗两个水分子
C.在进行基因工程操作中,天然质粒需经过人工改造后才能作为载体
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D利用酶解法处理植物细胞获得原生质体,便于进行植物杂交育种
答案BC
解析DNA连接酶可把目的基因与载体的黏性末端或平末端的磷酸二酯键
黏合,形成重组DNA,A错误;限制性内切核酸酶将一个DNA分子片段切成两
个片段,即断裂两个磷酸二酯键,因此需消耗两个水分子,B正确;在进行基因
工程操作中,真正被用作载体的质粒,都是在天然质粒的基础上进行过人工改造
的,C正确:用酶处理植物细胞获得原生质体,便于植物细胞融合,属于植物体
细胞杂交技术,植物杂交育种一般是通过杂交的方式获得所需的子代,D错误。
[例4(2021·全国乙卷改编)用DNA重组技术可以赋予生物以新的遗传特
性,创造出更符合人类需要的生物产品。在此过程中需要使用多种工具酶,其中
4种限制性内切核酸酶的切割位点如图所示。
GAATTC CCCGGG CTGCAG GATATO
限制酶:EeoR