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考点3
基因工程
脉络梳理连点成网
知识脉络
基因工程的操作对象是DNA分子,利用限制酶、DNA连接酶、载体等进行
基因工程的操作,基因工程在农牧业、医药卫生、食品工业等方面有广泛的应用,
在基因工程的基础上,崛起了第二代基因工程一蛋白质工程。
知识网络(对照课本回顾主干知识)
昝性末端·
分子手
目的基因的
可产生
常用的封增方法一PCR
术刀:
筛选与获取
平末端
限制
用限制酶分别切割载体
Ecoli DNA
·和含有日的基因的DNA
分子缝
连接博
基因表
片段
主要有合针:
基本
达体
步
T4 DNA
DNA
工具
的构建
,DNA连接酶连接形成重
连接酶
接斯
操作
组DNA分子
质粒常用
分了运输车:载体
因工程
植物细胞:花粉管通道
序
将日的常用
法、农杆菌转化法
基因导方法
入受体
·动物细胞:显微注财法
细胞
应用:
·傲生物细胞:Ca转化法
分子水平:检测DNA。
日的基因
包括mRNA、蛋白质
的检测与
蛋白质工程
鉴定
·个体水平
重要概念优化检测
重要概念1基因工程是一种重组DNA技术
[例1](2020北京等级考)为了对重金属污染的土壤进行生物修复,研究者将
从杨树中克隆的重金属转运蛋白(MA3)基因与外源高效启动子连接,导入杨树基
因组中(如图)
树内左边界
右边界桥树内
源DNA
启动子
HMA3基因
终止子
源DNA
②④
(注:①、②、周,④表示引物)
独家授权侵权必究
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为检测获得的转基因杨树苗中是否含有导入的MA3基因,同时避免内源
HMA3基因的干扰,在进行PCR扩增时,应选择的引物组合是()
A.①+③
B.①+②
C.③+②
D.③十④
答案B
解析PCR扩增时,由于子链延伸方向为5'端到3'端,因此应在模板DNA
两条链的3'端分别设计一个引物,A错误:为了对重金属污染的土壤进行生物
修复,研究者扩增获得的DNA片段只要既包含外源高效启动子序列又包含HMA3
基因的序列,便可在检测是否有MA3基因的同时,又可排除内源HMA3基因的
干扰,若用③十②或③+④引物组合进行PCR扩增,扩增获得的MA3基因不
包含外源高效启动子序列,C、D错误;若用①十②或①十④引物组合进行PCR
扩增,获得的DNA片段符合要求,B正确。
[例2](2022北京海淀期末)乳酸乙酯是白酒中重要的呈香物质,由乳酸脱氢
酶催化产生,影响白酒品质和风格。科研人员将酿酒酵母质粒上的丙酮酸脱氢酶
基因(PD)替换为植物乳杆菌中的乳酸脱氢酶基因(亿一PG,可获得乳酸乙酯高产
菌株,该过程如图所示。下列关于该过程的分析不合理的是(
)
P①PA
Yep352 PD
L-PG-
p352
PB
PB/
复制原点
PB
复制原点
A.转入的L一PG基因表达产物不能影响酿酒酵母活性
B.可以利用PCR技术筛选含有L一PG基因的受体细胞
C.通过同源重组实现酵母菌的PD基因被替换为L一PG基因
D.标记基因Amp'可检测是否成功构建乳酸乙酯高产菌株
答案D
解析酿酒酵母质粒上的PD基因替换为L一PG基因前后,标记基因Amp
'均正常,故标记基因Amp'不能检测是否成功构建乳酸乙酯高产菌株。
[例3](多选)下列关于生物工程中常见的叙述,正确的是()
A.DNA连接酶可把目的基因与载体的黏性末端的碱基黏合,形成重组DNA
B.限制性内切核酸酶将一个DNA分子片段切成两个片段需消耗两个水分子
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C,在进行基因工程操作中,天然质粒需经过人工改造后才能作为载体
D.利用酶解法处理植物细胞获得原生质体,便于进行植物杂交育种
答案BC
解析DNA连接酶可把目的基因与载体的黏性末端或平末端的磷酸二酯键
黏合,形成重组DNA,A错误:限制性内切核酸酶将一个DNA分子片段切成两
个片段,即断裂两个磷酸二酯键,因此需消耗两个水分子,B正确:在进行基因
工程操作中,真正被用作载体的质粒,都是在天然质粒的基础上进行过人工改造
的,C正确:用酶处理植物细胞获得原生质体,便于植物细胞融合,属于植物体
细胞杂交技术,植物杂交育种一般是通过杂交的方式获得所需的子代,D错误。
[例4](2021·全国乙卷改编)用DNA重组技术可以赋予生物以新的遗传特
性,创造出更符合人类需要的生物产