内容正文:
第1章发酵工程
第2节微生物的培养技术及应用
(第三课时)
爵
学习目标
通过实例,理解各类微生物都能适应其生
01
活环境。(生命观念)
通过对土壤中分解尿素的细菌进行分离和计
数,理解并掌握微生物计数的方法。(科学
目标
02
探究)
根据微生物的代谢类型,配制选择培养
基,总结分离微生物的过程和测定微生
03
物数量的常用方法。(科学思维)
温故知新:哮母菌的纯培养
①配制培养基(马铃薯、葡萄糖、琼脂、水)
培养基:湿热灭菌(高压蒸汽灭菌锅)
1.制备培养基
②灭菌
培养皿:千热灭菌(干热灭菌锅)
③倒平板(在酒精灯火焰附近操作)
母菌的纯培养
2.接种和分离酵母菌
用接种环在固体培养基上用平板划线法接种
3.培养酵母菌
平板倒置,放入28℃左右的恒温培养箱培养
问题1:自然界中微生物数量繁多,种类庞杂,要想从中分离出需要的特定微生
物并不容易,尤其当要分离的微生物在混合菌群中不是优势种群时,仅通过一般
的平板划线法或稀释涂布平板法很难实现。该怎么办呢?
选择培养基应运而生。
选择培养基
(一)科学实例:
寻找耐高温的DNA聚合酶
黄石公园(视频)
PCR是一种在体外DNA复制的技术
此项技术要求使用耐高温(93℃)的
DNA聚合酶。
1.筛选原因:
水生栖热菌能在70-80℃高温条件下生存
而绝大多数微生物在此条件下不能生存。
2.筛选思路:
寻找
寻找
耐高温的酶
耐高温生物体
高温环境(热泉、火山口)
选择培养基
(二)实验室中微生物筛选的原理:
人为提供有利于目的菌生长的条件(包括营养
、温度和pH等)
同时抑制或阻止其他微生物的生长
(三)概念:
在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种
类微生物生长的培养基称为选择培养基。
(四)类型:
改变微生物
改变培养基中
的培养条件
在培养基中
的营养成分
加入某种化
学物质
选择培养基
选择培养基
培养基
培养基+氨苄青霉素
+氨苄青霉素
没有抗氨苄青
霉素能力的菌
没有氨苄
落被淘汰
具有抗氨苄
青霉素抗
青霉素能力
性的细菌
的菌落
怎样选择出抗氨苄
青霉素能力的细菌?
问题3:怎么证明一个选
择培养基具有选择性呢?
选择培养基
问题4:怎么证明一个选择培养基具有选择性呢?
应该设置基础培养基(如牛肉膏蛋白胨培养基)或完全培养基作为对
照,若基础培养基或完全培养基中生长的菌落数菌多于该选择培养基,则
该选择培养基具有选择性。
基础培养基
选择培养基
问题5:如果让你配制一种培养基,将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出
来,培养基的配方该如何设计?
选择培养基
合作探究一:请同学们自主学习教材P16页,小组合作思考讨论完成问题。
1.如果让你配制一种培养基,将土壤稀释液中能分解尿素的细菌
分离出来,培养基的配方该如何设计?
2.该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点?
选择培养基
思考讨
选择培养基配方的设计
尿素含氮量高
论
性质稳定,是一种重要的农业氮肥,尿素施入土
壤后,被某些细菌分解成NH3,NH3再转化成NO3、NH4+等才能被植物吸收。
尿素的立体结构
土壤中尿素分解菌之所以能将尿素分解,是因为它们能合成脲酶:
CONH2)2+H20脲酶,2NH3+CO2
问题4:如果让你配制一种培养基,将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离
出来,培养基的配方该如何设计?