第一章 第二节 纯净的目标微生物可通过分离和纯化获得-【精彩三年】2022-2023学年新教材高中生物选择性必修3 生物技术与工程教师用书word（浙科版）

享学科网书城国 品牌书店·知名数辅·正版资源 b.zxxk.com 您身边的互联网+教辅专家 第二节 纯净的目标微生物可通过分离和纯化获得 课程解读 知能目标 核心素养 1.认识平板划线法和稀释涂布平板法是分离 1.概述分离和纯化微生物的平板划线法和稀 和纯化微生物的重要方法，尝试分离和纯化 释涂布平板法 酵母南，学会平板划线法和稀释涂布平板法。 2.举例说明通过调整培养基的配方，可有目 设计实验方案，有目的地培养某种微生物 的地培养某种微生物 2.认识稀释涂布平板法和显微镜计数法是测 3.概述测定微生物数量的稀释涂布平板法和 定微生物数量的重要方法，尝试分离和计数 显微镜计数法 能分解尿素的微生物，学会稀释涂布平板法 计数微生物 新教材·知本与思辨 学科素养研读、知本、思辨一 (见学生用书P8) 回知识点一采用划线或涂布的接种方法能够实现对目标微生物的分离和纯化 1.接种：微生物进入培养基质的过程，包括自然接种和人为接种。 2。单菌落：在固体培养基上通过接种、培养获得的由一个细胞分裂形成的、肉眼 可见的、有一定形态构造的子细胞集团。 3.平板划线法 ()方法：通常用接种环灌取液体培养物或挑取固体表面的微生物后，在固体培养基 表面进行连续平行划线、扇形划线或其他形式的划线，以实现接种的目的。 (2)划线方式的比较 划线方式 划线方法 示意图 连续平行 从培养基上的一点出发，向左右连续划平行线 划线 至覆盖整个培养基表面 从培养基上的一点出发，向多方向多次划线， 扇形划线 每划一条线，都要将接种环在酒精灯的火焰 ◆独家授权侵权必究· 享学科网书城国 品牌书店·知名教辅·正版资源 b.zxxk.com 您身边的互联网+教辅专家 上灭菌，然后再次从同一起点变换方向 划线 划线可分3一4次进行。将培养皿旋转一定 多次连续平行划线 角度后，不需再次蘸取菌种，只需在上一次 划线的末端区域直接开始划线即可 4. 稀释涂布平板法 通常需要先将菌液进行梯度稻程，并在培养 概念 皿侧而或底而做好标记后，将丽秤度不同 的菌液各取0.1mL,加在面体培养套 表面，然后用涂布器将阔液均匀地深布在培 稀 养基表面上进行培养 释 结果在稀释度适当的固休培养基表面能得到单个 细胞生长繁殖成的单菌落 平板法 1 ml 器需要计数的菌液 稀释 I ml I ml.I mL 1 mL I ml 图示 9 ml 无菌水 1/101/1001/10/101/10°1/10㎡ (10(1010(1010109 加人0.1m稀释液 1159 17 2 无法计数 菌落数 小思考：为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？为什么在划线樑 作结束时，仍然需要灼烧接种环？ 【答案】 灼烧时期 目的 取菌种前 杀死接种环上原有微生物 杀死上次划线时残留的菌种，使下一次划线的菌种直接来源于上次划线的 每次划线前 末端，从而使每次划线时菌种数日逐渐减少，达到分离菌株的目的 接种结束后 杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者 回知识点二活动：接种、培养并分离酵母菌 1. 目的要求 ◆独家授权侵权必究 草学科网书城 品牌书店·知名教辅·正版资源 Mb2xXk.com● 您身边的互联网+教辅专家 (①)用平板划线法或稀释涂布平板法接种酵母菌。 (2)用液体培养基大量扩增酵母菌。 2.方法步骤 (1)制作平板：对两个直径为90mm的培养进行标记，分别向其中倒入未凝固的 固体培养基，使培养基铺满培养底部，厚度约2mm。 (2)接种 方法 操作提示 ①在用接种环滙取菌液进行接种前，应在酒精灯火焰上从接种环的圆环处依次向 上灼烧灭菌 平板划 ②为避免灭菌后接种环的高温烫死芮种，应在挑取菌种前将接种环贴在培养容 线法 器内壁上隆温 ③初次划线时可参照培养皿底部的标记点进行划线，以保证有最好的划线分离 效果 ①用无菌水对酵母菌菌液进行一定浓度的稀释 稀释涂 ②取0.1mL的稀释菌液加入平板中央 布平板 ③在使用随有酒精的涂布器对平板中的菌液进行涂布时，应先在火焰上使酒精燃 法 烧尽。此时手持涂布器的部位应高于火焰，以免酒精沿器具流下，烧伤手指 (③)将菌种接种到液体培养基中。在无菌条件下用接种环将菌液接种到液体培养基中，同 时以不接种菌液的液体培养基作为对照。 (4)培养。将所有培养容器置于25℃下培养24h。 (⑤观察培养结果。获得单菌落后，可挑取菌落，并利用划线法接种至斜面培养基中。 小思考：在划线操作时，如果接种环不慎划破培养基，可以继续正常进行操作吗？为什 么？ 【答案】不能。因为划破培养基会造成划线不均匀，难以分离单菌落，可能导致微生 物的厌氧呼吸或杂菌污染。 ©知识点三稀释涂布平板法和显微镜计数法可测定微生物的数量 1.稀释涂布平板法 (①)原理：当样品的稀释度足够