第2部分 热点6 基因工程中PCR的原理及应用-【导与练】2023高考生物二轮复习教师用书word（新教材）

学科网书城画 品牌书店·知名教辅·正版资源 b.zxxk.com 您身边的互联网+教辅专家 热点6基因工程中PCR的原理及应用 [知识关联] 模板 常规PCR 原料 反向PCR 与体内复制的区别 DNA复制 酶 分类 大引物PCR 引物 重叠延伸PCR PCR及其应用 变性 目的基因的获取和扩增 反应过程 目的基因的检测 相关数据的计算 复性 应用 定点诱变 延伸 [针对训练】 1.(2022·山东威海二模)《新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第九版）》 对于解除隔离管理标准做了新规定：轻型病例连续两次新型冠状病毒 核酸检测（采样时间至少间隔24小时）N基因和0F基因Ct值均≥35， 可解除隔离管理。利用荧光定量PCR方法测某基因的Ct值是指将某 目的基因与过量的荧光素混合后放入PCR反应体系中，随PCR产物的 积累荧光信号逐渐增强，将荧光信号到达设定阈值时所经历的循环次 数称为Ct值。下列说法错误的是(B) A.利用荧光定量PCR方法测N基因和ORF基因的Ct值时，应先通过逆 转录得到N基因和ORF基因对应的DNA序列 B.采样标本中的N基因和ORF基因数量越多，Ct值越大 C.PCR反应过程中每次循环都要经历目的各不相同的两次升温和一次 降温 ·独家授权侵权必究· 学科网书城画 品牌书店·知名教辅·正版资源 b.zxxk.com 您身边的互联网+教辅专家 D.基因工程中PCR技术可用于获取和扩增目的基因以及检测目的基 因是否插入受体细胞的染色体DNA上 解析：分析题意，将荧光信号到达设定阈值时所经历的循环次数称为 Ct值，故样本中初始模板越多时，达到设定的荧光阈值时所经历的扩 增循环数就越小，Ct值就越低 2.(2022·全国高三专题练习)如图是快速RT-PCR过程示意图，①和② 为逆转录酶催化的逆转录过程，③是PCR过程。据图分析下列说法错 误的是(B) 5'、引物a 3 5 ①↓ 5靶RNA 3'eDNA 3 ②↓ 5'RNA 3'eDNA ③… 引物b 5eDNA A.逆转录酶具有DNA聚合酶能力 B.③过程只需要引物b C.RT-PCR可检测基因是否转录 D.RT-PCR可检测新型冠状病毒等RNA病毒 解析：③PCR过程需要引物a、b。 3.(2020·江苏卷)如果已知一小段DNA的序列，可采用PCR的方法，简 捷地分析出己知序列两侧的序列，具体流程如图（以EcoR I酶切为 例)： ·独家授权侵权必究· 学科网书城园 品牌书店·知名教捕·正版资源 .zxxk.com● 您身边的互联网+教辅专家 之 染色体DNA I降切ER1〔) 混合的DNA片段 5未知序列 已知序列 未知序列'片段F Ⅱ连接！DNA连接酶 已知序列 PCR引物 环状DNA EeoR I Ⅲ扩增！Tag DNA聚合酶 PCR产物 V测序分析 5 3片段F 的完整 序 请据图回答问题。 (1)步骤I用的EcoR I是一种 酶，它通过识别特定 的 切割特定位点。 (2)步骤Ⅱ用的DNA连接酶催化相邻核苷酸之间的3'-羟基与5'一磷 酸间形成 :PCR循环中，升温到95℃是为了获 得 ;Taq DNA聚合酶的作用是催 化 (③)若下表所列为已知的DNA序列和设计的一些PCR引物，步骤II选用 的PCR引物必须是 (从引物①②③④中选择，填编号)。 DNA序列（虚线处省略了部分核苷酸序列） 已知 5-AACTATGCGCTCATGA- 3-TTCATACCCCACTACT- 序列 CCAATCCCTACCCTCT-3 CCTTACCCATCCCACA-5 PCR D5-AACTATGCGCTCATGA-3' 独家授权侵权必究· 享学科网书城国 品牌书店·知名教辅·正版资源 量b.2 xxk.com● 您身边的互联网+教辅专家 引物 25-GCAATGCGTAGCCTCT-3' 35-AGAGGCTACGCATTGC-3' 5-TCATGAGCGCATAGTT-3' (4)对PCR产物测序，经分析得到了片段F的完整序列。下列DNA单链 序列中（虚线处省略了部分核苷酸序列），结果正确的是 A.5'-AACTATGCG-----AGCCCTT-3' B.5'-AATTCCATG-----CTGAATT-3' C.5'-GCAATGCGT-----TCGGGAA-3 D.5'-TTGATACGC-----CGAGTAC-3' 解析：(1)根据题图可知，步骤I是为了获取日的DA片段，所用的 酶EcoR I是一种限制酶，其能识别特定的核苷酸序列，并使每一条 链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。(2)步骤Ⅱ是 将目的DNA片段连接成环状，其中DNA连接酶的作用是催化相邻核苷 酸之间的3'一羟基和5'一磷酸间形成磷酸二酯键。PCR循环中，升高 温度到超过90℃是