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第19讲
基因工程及生物技术的安全性与伦理问题
课标要求
考情分析
1.概述基因工程是在遗
传学、微生物学、生物化
学和分子生物学等学科
基础上发展而来的。
2.阐明DNA重组技术的实
该部分内容主要结合遗传和变异的知识综
现需要利用限制性内切
合考查基因工程的操作工具及过程,蛋白
核酸酶、DNA连接酶和载
质工程的应用,注重与生产生活的联系。重
体三种基本工具。
在考查限制酶的选择,目的基因的检测与
3.阐明基因工程的基本
鉴定,PCR技术的原理,引物的作用及选择,
操作程序主要包括目的
基因导入后受体细胞的变化。考查形式多
基因的获取、基因表达载
以非选择题形式,近几年题目综合性逐渐
体的构建、目的基因导入
加大。
受体细胞和目的基因及
本讲主要考查的能力点有获取信息的能
其表达产物的检测鉴定
力、总结归纳能力、理解推理能力
等步骤。
4.举例说明基因工程在
农牧、食品及医药等行业
的广泛应用改善了人类
的生活品质。
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限制酶
①DNA连接酶
操作工具
转基因成果
载体
安全性
物
转基因产品的安全性
问题
月的基因的筛选与获取。
技
基
术
理性看待转基因技术
②基因表达载体的构建·
操作程序
伦理问题
将目的基因导入受体细胞
工
安
全
生殖性
我国政府④不赞成、不允许、不支持、不接受
目的基因的检测与鉴定
性
克隆人
四不原则
基因工程在农牧业方面的应用·
与
+设计试管婴儿
基因工程在医药卫生领域的应用·
应用
理
种类致病菌类、病毒类、生化毒剂类
基因工程在食品工业方面的应用
生物
操作蛋
题
武器
③基因
对像
发展
我国政府在任何情况下⑤不发展、不生产不储
质
的观点
可生产自然界中没有的蛋白质,结果
存生物武器,并反对生物武器及其技术
工
程
和设备的扩散
热点突破
突破热点专题·达到知识融通
热点一
基因工程和蛋白质工程
写知识必备
[情境引领]
人体内的tPA蛋白能高效降解血栓,是心梗和脑血栓的急救药,但大
剂量使用会诱发顿内出血。如果将t-PA蛋白第84位的半胱氨酸换成
丝氨酸,能显著降低出血副作用。先对天然的tPA基因进行序列改造,
然后在大肠杆菌中表达改造后的基因,可得到性能优异的改良tPA
蛋白。如图是通过重叠延伸PCR技术获取t-PA改良基因和利用质粒
PCLY IⅡ构建含tPA改良基因的重组质粒示意图(图中重叠延伸PCR过
程中,引物a、b用来扩增含有突变位点的上游DNA序列,引物c、d用
来扩增含突变位点的下游DNA序列)。判断下列叙述正误。
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t-PA基因
引物a
引物c
XXX
00×
PCR1
引物b
引物Sma I
PCR2
Xma I
产物AB十
BgiI
产物CD
Lac Z
Nhe I
PCLY II
AB上链+
Neo"
CD下链
Ori
组质
重叠延伸
PCR3
CCGG
突变产物AD
CTAG
(c-PA改良基因)
B-PA改良基因
注:限制酶识别序列和切割位点
BgIⅡAGATCT
Nhe I GCTAGC Neo':新毒素抗性基因
↓LacZ:表达产物会使细胞呈
Sma I CCCGGG
蓝色,否则细胞呈白色
Xma I CCCGGG
(1)生产改良t-PA蛋白的技术属于基因工程。(×)
提示:生产改良tPA蛋白的技术属于蛋白质工程。
(2)PCR中需要引物的原因是DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,而只
能从3'端延伸DNA链。(√)
(3)重叠延伸PCR中,PCR1和PCR2分别进行,产物混合后再进行PCR3。
PCR1和PCR2需要分别进行的原因是两个过程需要的酶不同。(×)
提示:PCR1和PCR2需要分别进行的原因是引物b和引物c可以互补
配对,导致引物失效。
(4)构建重组质粒时,选用的限制酶是XmaI和Bg1Ⅱ。(√)
(⑤)新霉素抗性基因的作用是筛选出导入质粒pCLYⅡ(普通质粒)和重
组质粒的大肠杆菌(受体细胞)。(√)
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(6)在加入新霉素的培养基中能正常生长的大肠杆菌并非都是目的菌
株,仍需选择呈蓝色的菌落,进一步培养、检测和鉴定,以选育出能生
产改良t-PA蛋白的工程菌。(×)
提示:导入重组质粒的大肠杆菌,因为其中的LacZ基因在构建重组质
粒时被破坏,则该细菌表现为白色。
[基础巩固]
1.限制性