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专题21细胞工程和胚胎工程
(2023届安微省黄山市高三一模理综)11.新冠病毒是RNA病毒,病毒的S蛋白(刺突蛋白)
是决定病毒入侵易感细胞的关键蛋白,可与宿主细胞的受体结合。下面为两种针对新冠病毒
的疫苗研发方法,回答下列问题。
方法
技术路线
基因工程疫苗
S蛋白基因一基因表达载体→大肠杆菌一S蛋白→人体
腺病毒载体重组疫苗
$蛋白基因·腺病毒基因表达载体→人体
(1)基因表达载体的组成除了$蛋白基因外还必须有标记基因、启动子、
(答
出2点)等。基因表达载体的构建有利于目的基因完成转化,转化是指
(2)基因工程疫苗制备过程中需要分离和提纯大肠杆菌,通常情况下,我们需要对培养基
进行
灭菌,当采用平板划线法分离大肠杆菌时,第二次及以后的划线都要从上
一次划线的末端开始,其目的是
(3)除研制疫苗外,还可对新冠病毒进行免疫学检测以阻断传播途径,其过程是:
①向小鼠体内注射新冠病毒S蛋白后分离产生的B淋巴细胞,并与小鼠的骨髓瘤细胞融合,
常用的融合方法有
(答出1种):再多次筛选、检测,最终获得所需杂交瘤细
胞,该种细胞的特点是
②获得的杂交瘤细胞可在体外条件下做大规模培养,或注射到
内增殖,获得大
量可与S蛋白特异性结合的单克隆抗体作为诊断试剂。
【答案】(1)
①.终止子、复制原点
②.目的基因进入受体细胞内,并且在受体细
胞内维持稳定和表达的过程
(2)
①.高压蒸汽灭菌(湿热灭菌)
②.使微生物的数目随着划线次数的增加而减
少(保证接种环上的细菌来自上一次划线的末端)
(3)
①.PEG融合法(灭活病毒诱导融合)
②.既能迅速大量繁殖,又能产生与S
蛋白特异性结合的专一抗体③.小鼠腹腔
【解析】
【分析】单克隆抗体的制备:(1)制备产生特异性抗体的B淋巴细胞:向免疫小鼠体内注
射特定的抗原,然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。(2)获得杂交瘤细胞:①将鼠的
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骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合:②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞,
该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。(3)克隆化培养和抗体检测。(4)将杂交瘤细胞在体
外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。(5)提取单克隆抗体:从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。
【小问1详解】
基因表达载体包括复制原点、启动子、终止子、标记基因、目的基因等。基因表达载体的构
建有利于目的基因完成转化,转化是指目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳
定和表达的过程。
【小问2详解】
为防止杂菌污染,对培养基往往要进行高压蒸汽灭菌;采用平板划线法分离大肠杆菌时,第
二次及以后的划线都要从上一次划线的末端开始,其目的是使微生物的数目随着划线次数的
增加而减少(保证接种环上的细菌来自上一次划线的末端)。
【小问3详解】
①诱导动物细胞融合的方法有电融合法、聚乙二醇、灭活病毒等诱导;经过多次筛选、检测,
最终获得的所需杂交瘤细胞既能迅速大量繁殖,又能产生与S蛋白特异性结合的专一抗体。
②杂交瘤细胞可在体外条件下做大规模培养,或注射到小鼠腹腔内增殖。
(2023届广东省惠州市高三第三次调研考试)20.我国在抗击新冠肺炎领域取得了举世瞩目的
成就,三类具有自主知识产权的疫苗都有较好的安全性和免疫源性(能引起免疫应答的性
能),阅读下面材料回答问题:
疫苗l:灭活疫苗(Vero细胞)。是将用Vero细胞(非洲绿猴肾细胞)培养扩增后的活病毒
通过物理和化学的方法杀灭以后,经过系列纯化技术制备的疫苗。
疫苗2:复制缺陷型腺病毒载体疫苗。将新冠病毒的S蛋白基因整合到复制缺陷型腺病毒
DNA中,形成能表达S蛋白的重组复制缺陷型腺病毒,作为疫苗注射到健康人体内。
疫苗3:重组新型冠状病毒疫苗(CHO细胞)。将新冠病毒S蛋白基因重组到中国仓鼠卵巢
细胞(CHO)基因组内,经CHO细胞表达形成S蛋白作为疫苗。
(1)疫苗1的免疫源性要稍高于另外两种疫苗的原因是。从疫苗生产过程的角度看:
疫苗1的生产车间的安全等级高于另外两种疫苗的原因是
(2)从生物工程的角度看,生产过程中需要用到基因工程技术的是?一
(用“疫苗1/疫
苗2疫苗3作答):都要用到细胞培养技术的是:
(用疫苗1/疫苗2/疫苗3”作答):
(3)培养抗原表达细胞系(er©细胞或CHO细胞)时,培养基中要加入糖类、氨基酸等
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有机物,作用是;培养箱中CO2浓度为5%。作用是
。
在培养过程中,ro细胞
分裂生长到细胞表面相互接触时,细胞会停止分裂增殖,长成致密的单层,这种现象称为
—一;若需要进行传代培养,需要用
酶等处理后再收集细胞制成新的细胞悬液。
【答案】(1)
①.它的抗原成分是灭活的全病毒②.用V伦o细胞(非洲绿猴肾细胞)
培养扩增的是活病毒,有更易传染的风险
(2)
①.疫苗2和疫苗3②.疫苗1、疫苗2