专题20 基因工程-学易金卷：2023年高考生物一模试题分项汇编

专题20基因工程 (2023届安微省合肥市高三第一次教学质量检测)20.某质粒上有SalⅡ、HindⅢ、BamH I三 种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因，获得此质粒的农杆菌表 现出对两种抗生素的抗性。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程，如下图所示。请据图分 析，下列表述错误的是() Hid IⅢBamH ISal I 含抗盐基 农杆菌 因的DNA 抗盐基因 SalI 前伤组织 抗四环素基因 重组 抗氨苄青 -BamH I 质粒 烟草细胞 转基因抗盐 霉素基因 Hind III 烟草幼苗 A.在构建重组质粒时，选用HidⅢ和SalI两种酶切割目的基因的两端及质粒可防止目的基 因和质粒的自我环化 B.用分别含有氨苄青霉素和四环素的培养基筛选农杆菌时，发现含有目的基因的农杆菌不 能在含四环素的培养基上生长，说明抗四环素基因未起到标记基因的作用 C.采用农杆菌转化法是因为农杆菌感染烟草细胞时，其内的重组T质粒上的TDNA能将 目的基因插入到烟草细胞的染色体DNA上 D.利用植物组织培养技术培育转基因抗盐烟草植株，依据的原理是高度分化的植物细胞具 有发育成完整植株的能力 【答案】B 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤：(1)目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用 PCR技术扩增和人工合成。(2)基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达 载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。(3)将目的基因导入受体细胞：根据受 体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因 枪法和花粉管通道法：将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法：将目的基因导 入微生物细胞的方法是感受态细胞法。(4)目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：① 检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因-DNA分子杂交技术；②检测目的基因是 否转录出了mRNA-分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质-抗原-抗体杂交技 术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 第1页/共67页 【详解】A、在构建重组质粒时，选用HidⅢ和SaⅡ两种不同的限制酶切割目的基因的两 端及质粒可防止目的基因和质粒的自我环化，A正确： B、所给的限制酶在质粒上的切割位点都位于抗四环素基因的部位，如果目的基因插入到质 粒中，得到重组质粒，则含重组质粒的农杆菌只含有完整的抗氨苄青霉素基因，不含完整的 抗四环素基因（被目的基因破坏），则含有目的基因的农杆菌不能在含四环素的培养基上生 长，这能说明抗四环素基因起到了标记基因的作用，B错误： C、农杆菌中的TDNA可转移至烟草细胞，并整合到烟草细胞染色体的DNA上，因此将 目的基因导入植物细胞采用农杆菌转化法，C正确： D、植物组织培养技术依据的原理是植物细胞的全能性，D正确。 故选B。 (2023届安徽省淮北市高三一模)25.针对奥密克戌变异株的第四针剂新冠疫苗威克欣”，是 将新冠病毒基因引入昆虫细胞，制备新冠病毒S蛋白。该疫苗注入人体后诱导产生抗体，目 前该产品已实现大规模生产。回答以下问题： (1)新冠病毒基因经过逆转录后形成的DNA,常采用 技术扩增。 (2)基因工程的核心步骤是 :该过程需要在目的基因上游和下游分别添加特定 的 和终止子，以便使目的基因可以正常 (3)若用病毒作为运载体将新冠病毒基因导入昆虫细胞和大肠杆菌，所用的病毒 (填“相同”或“不相同”)。若要通过培养大肠杆菌生产该疫苗，则需要分离和提纯大肠杆菌， 通常情况下，我们需要对培养基进行 灭菌，当采用平板划线法分离大肠杆菌时， 第二次及以后的划线都要从上一次划线的末端开始，目的是 【答案】(1)PCR (2) ①.基因表达载体的构建 ②.启动子 ③.转录（表 达) (3) ①.不相同②.湿热灭菌（高压蒸汽灭菌） ③.划线后，线条末端细菌的 数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增 加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落 【解析】 【分析】基因工程的基本操作程序主要包括4个步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构 建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定；分离纯化菌种的方法有平板划线法 和稀释涂布平板法。 第2页/共67页 【小问1详解】 新冠病毒基因(RNA)在逆转录酶的作用下，经过逆转录后形成的DNA,常采用PCR技术 对其进行扩增。 【小问2详解】 基因工程的基本操作程序主要包括4个步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目 的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定，其中核心步骤是基因表达载体的构建：该过 程需要在目的基因上游和下游分别添加特定的启动子（它是RNA聚合酶识别和结合的部位， 驱动基因的转录)和终止子（使