2.2土壤中分解尿素的微生物的分离与计数课件2021-2022学年高二下学期生物人教版选修1

专题2：微生物的培养与应用 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分 离与计数 一、课题背景 1、尿素的利用 尿素是一种重要的农业氨肥。尿素不能直接被农作物吸收。土 壤中的细菌将尿素分解成复之后才能被植物利用。 2、细菌能利用尿素的原因 土壤中的细菌分解尿素是因为它们能合成脲酶 CO(NH2)2+H2O 脲酶 2NH3+CO2 3、常见的分解尿素的微生物 芽杆菌、小球菌、假单胞杆菌、克氏杆菌、棒状杆菌、梭状 芽包杆菌，某些真菌和放线菌也能分解尿素。 4、课题目的 ①从土壤中分离出能够分解尿素的细菌 ②统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌 研究思路 (–)。筛选菌株 ()。统计菌落数目 (≡)。设置对照 (一).筛选菌株 1、实例：PCR技术 DNA多聚酶链式反应是一种在体 外将少量DNA大量复制(PCR)的 技术，此项技术要求使用耐高温 (93C)的DNA聚合酶。 原因：因为热泉温度70~80℃，淘汰了绝大多数微生物只有 Taq细菌被筛选出来。 启示：寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要球，到相应的环 境中去寻找。 2、实验室中微生物的筛选原理： 人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH 等，同时抑制或阻止其他微生物生长。 要分离一种微姓物，必须根据该微生物的特点，包括营养、 生理、生长条件等： 方法： (1)抑制大多数微性物的生长 (2)促进目的菌株的生长 结果：培养一定时间后，该菌数量上升，再通过平板稀释等方 法对它进行纯化培养分离。 )本课题使用的培养基配方 (包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生 KH.PO, 1.4g 长 Na HPO 2.1g 请你根据这一思路，分析旁栏中本课题将用到的培养 MgSO.·7H,O 0.2g 基配方，回答下面的问题。 葡葡帮 10.0g 1.在该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和 尿素 1.0g 窥源的分别是什么物质？ 琼脂 15.0g 将上述物质溶解后，用基水 2.绝大多教微生物都能利用前萄糖，但是，只有能合 定容到1000mL。 成脲酶的微生物才能分解尿素，请你分析该培养基的配方 想一想这种培养基对激生物是否具有选择作用？如果具有， 是如何进行选择的？ 在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时 抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养 基(selective media). 3、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数所需培养基： KH2PO4 1.4g NaH2PO4 2.1g MgSO4 7H2O 0.2g 葡萄糖 10.0g 尿素 1.0g 琼脂 15.0g ①从物理性质看此培养基属于哪类？ 固体培养基 ②在此培养基中哪些作为碳源、氮源? 碳源：葡萄糖氮源：尿素 4、培养基选择分解尿素的微生物的原理： 培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的KH，PO，-_—1.4g 微生物才能分解尿素，以尿素作为唯一员 源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，NaH，PO，2.lg 缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑MgS0，7H，00.2g 制，所以用此培养基就能够选择出分解尿葡糖，。│_10.0g 素的微生物。 以尿素作为唯一氮源端________l50g 选择培养基： 允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生 长的培养基，叫做选择培养基 K,P0, 1.4g NaH,PO, 2.1g MgSO,7H,O 0.2g 葡萄糖 10.0g 尿素 1.0g 琼脂 15.0g 5、怎样正明此培养基具有选择性呢？ (设置对照试]验) 培养基类型 是否 目的 结果 接种 以尿素为 分离 只生长尿 实验组 唯一氮源 是 尿素 素细菌 的培养基 细菌 牛肉膏 判断该 生长多种 对照组 蛋白胨 是 培养基 微生物 培养基 有无选 (完全培养基) 择性 观察菌落数目的多少