内容正文:
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二轮· 生物
要点整合 · 核心突破
主干知识 · 网络构建
专题检测 · 跟踪演练
[目标要求] 1.微生物的分离和培养 2.培养基对微生物的选择作用 3.某种微生物数量的测定 4.利用微生物进行发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用 5.从生物材料中提取某些特定的成分
6.运用发酵加工食品的基本方法 7.测定食品加工中可能产生的有害物质 8.蛋白质的提取和分离 9.酶活力测定的一般原理和方法 10.酶在食品制造和洗涤等方面的应用 11.制备和应用固定化酶 12.DNA的粗提取与鉴定
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灭菌
尿素
稀释涂布平板
纤维素
刚果红染色
乳酸菌
水蒸气蒸馏法
萃取
纸层析
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1.牛肉膏和蛋白胨来源于动物原料,含有糖、维生素和有机氮等营养物质。牛肉膏主要提供碳源、氮源、磷酸盐和维生素等营养。蛋白胨主要提供碳源、氮源和维生素。(选修1 P15)
2.微生物的接种技术还包括斜面接种、穿刺接种等方法。虽然这些技术的操作方法各不相同,但是,其核心都是要防止杂菌的污染,保证培养物的纯度。(选修1 P18)
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3.每克样品中的菌株数=(C÷V)×M。其中,C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M代表稀释倍数。(选修1 P22)
4.细菌的数目还可以通过滤膜法来测定(以测定饮用水中大肠杆菌的数目为例)。将已知体积的水过滤后,将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养。在该培养基上,大肠杆菌的菌落呈现黑色。可以根据培养基上黑色菌落的数目,计算出水样中大肠杆菌的数量。(选修1 P26)
5.在缺水状态下,微生物处于休眠状态。活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态。(选修1 P50)
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6.理清微生物培养的基本技术
(1)培养基的制备:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。
(2)无菌技术。①消毒:煮沸消毒法、巴氏消毒法以及使用化学试剂进行消毒。②灭菌:对培养基进行灭菌,常采取高压蒸汽灭菌;对接种环灭菌采取灼烧灭菌;对玻璃器皿灭菌采取干热灭菌。
(3)倒平板:严格按照教材操作步骤进行,倒平板时培养基需冷却至50 ℃左右,在酒精灯火焰附近无菌区倒平板,平板冷却凝固后,将平板倒置,使皿盖在下,皿底在上。
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(4)接种:常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。①平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后培养,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落。②稀释涂布平板法:将菌液进行一系列梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落。
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微生物的培养、分离与计数
1.培养基的成分与种类
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2.微生物培养中的无菌操作技术
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3.培养基制备与微生物的纯化技术
(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
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(2)两种微生物纯化技术的比较
项目 平板划线法 稀释涂布平板法
纯化原理 通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面 将菌液进行一系列的梯度稀释,稀释度足够高时,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞
主要步骤 平板划线操作 系列梯度稀释操作和涂布平板操作
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4.熟记微生物分离与计数的两个实例
(1)土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
①筛选菌株:利用 筛选菌株。
②测定微生物数量的常用方法: