2.2.2 动物细胞融合（含视频）-【互动新课堂】2022-2023学年高二生物同步优质课件（人教版2019选择性必修3）

第2节 动物细胞工程（二） Section 2 Animal Cell Engineering (2) Fusion of animal cells and preparation of monoclonal antibody 1 初识单克隆抗体 温故知新 什么是抗体？ 什么是单克隆抗体？ 01. 02. 抗体（antibody）是指机体由于抗原的刺激由浆细胞分泌的具有保护作用的一种免疫球蛋白。 单克隆抗体是由单一B细胞产生的高度专一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。 单克隆抗体具有特异性强，灵敏度高的特点 产量低、纯度低、特异性差 2 3 制备过程分析 理性分析 锁定所需要的B细胞 利用基因工程手段制备工程菌 通过分子生物学手段检测产生特定抗体的基因 通过培养微生物使其产生抗体 视频笔记 细胞工程是指应用细胞生物学、分子生物学和发育生物学等多学科的原理和方法，通过细胞器、细胞或组织水平上的操作，有目的地获得特定的细胞、组织、器官、个体或其产品的一门综合性的生物工程。 发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品。它涉及菌种的选育和培养、产物的分离和提纯等方面。 分离、提纯、剪切、拼接等基因操作技术手段复杂 基因工程对仪器设备等到要求很高 4 寻求细胞工程手段 为何不直接培养相应的B淋巴细胞以获得单克隆抗体？ 需要对B淋巴细胞进行怎样的改造？ 根据材料，你能得到什么样的启示？ 早在19世纪, 人们就发现在自然条件下生物界中有“自发”的细胞融合现象。Muller( 1838年 ) 在 肿瘤中观察到了多核细胞, 此后在由病毒感染的病人 组织中如天花脓疱的周围、受水痘损害的皮肤、在麻疹病人的扁桃体中陆续发现多核细胞 5 动物细胞融合技术 概念 动物细胞融合技术（cell fusion technique）就是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。 结果 形成杂交细胞。即融合后形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息 6 动物细胞融合技术 问题1 动物细胞融合的原理（理论基础）？ 问题2 动物细胞融合成功的标志？ 问题3 从方法步骤、诱导手段、用途方面比较植物体细胞杂交和动物细胞融合过程的区别 7 关于灭活病毒诱导法 灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏它们的抗原结构 灭活病毒 病毒表面含有的糖蛋白和一些酶与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的 蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打 开，细胞发生融合。 诱融原理 8 动物细胞融合技术的意义 意义 细胞融合技术克服了远缘杂交不亲和的障碍，打破了生殖隔离，扩展了杂交的亲本组合 9 动物细胞融合技术 问题1 动物细胞融合的原理（理论基础）？ 问题2 动物细胞融合成功的标志？ 问题3 从方法步骤、诱导手段、用途方面比较植物体细胞杂交和动物细胞融合过程的区别 10 动植物细胞工程相似技术对比 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 依据原理 细胞融合的方法 诱导方法 用途 获得杂种植株 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性 细胞的全能性 去除细胞壁后诱导原生质体融合 使细胞分散后诱导细胞融合 电融合法、离心法 聚乙二醇融合法、电融合法和灭活病毒诱导法 主要用于制备单克隆抗体 聚乙二醇融合法、高Ca+—高PH融合法 成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段 11 12 单克隆抗体的制备过程 理性分析 1.单克隆抗体制备过程涉及几种动物细胞工程技术手段？ 2.将特定抗原注入到小鼠体内的目的？ 3.②过程能产生几种类型的杂交细胞？如何从中筛选出③？ 4.得到④之后还需要进一步筛选吗？ 13 单克隆抗体的制备过程 14 杂交瘤细胞的选择原理 HAT培养基 筛选杂交瘤细胞所使用的特定培养基 H A T 次黄嘌呤（hypoxanthine） 氨基蝶呤 (aminopterin) 胸腺嘧啶核苷 （thymidine） 氨基蝶呤能阻断所有细胞合成DNA的合成途径（D途径） 当D途径被阻断后，细胞中的HGPRT酶和TK酶能利用次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷进行补救途径的DNA合成（S途径） 实验中选择的骨髓瘤细胞中缺乏HGPRT酶和TK酶 背景材料 15 杂交瘤细胞的选择原理 HAT培养基 B BB 和 A AA 和 AB 高度分化的细胞一般不具备分裂能力 D途径受阻，且不能利用次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷进行S途径补救 D途径受阻，但能通过B细胞带来的HGPRT和TK利用次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷进行S途径补救 死 死 活 16 单科隆抗体的制备过程 理性分析 1.单克隆抗体制备过程涉及几种动物细胞工程技术手段？ 2.将特定抗原注入到小鼠体内的目的？ 3.②过程能产生几种类型的杂交细胞？如何从中筛选筛选出③？