1.2.2微生物的选择培养与计数课件2022-2023学年高二下学期生物人教版选择性必修3

1.2.2微生物的选择培养和计数 高压蒸汽灭菌 液体培养基 自然界中微生物数量繁多，种类庞杂，要想从中分离出需要的特定微生物并不容易，尤其当要分离的微生物在混合菌群中不是优势种群时，更难实现，仅通过一般的平板划线法或稀释涂布平板法很难实现。该怎么办？ 选择培养基应运而生。 问题探讨 聚合酶链式反应（PCR）是一种在体外扩增DNA片段的技术，此项技术要求使用耐高温的DNA聚合酶。1973年，科学家从美国黄石国家公园的热泉中筛选出水生栖热菌，进而提取出耐高温的DNA聚合酶。这种酶目前已被广泛用于聚合酶链式反应（PCR） 讨论： 1.筛选水生栖热菌的思路是什么样的？ 2.为什么水生栖热菌能从热泉中筛选出来呢？ 根据微生物对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找 耐高温的酶 耐高温生物体 高温环境（热泉、火山口） 寻找 寻找 这是因为水生栖热菌能在70-80℃的高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下不能生存。 培养基中加氨苄青霉素 具有抗氨苄青霉素能力的菌落 长出各种各样的细菌 培养基+氨苄青霉素 没有抗氨苄青霉素能力的菌落被淘汰 怎样选择出抗氨苄青霉素能力的细菌? 培养基 一、选择培养基 怎么证明一个选择培养基具有选择性呢？ 思考： 怎么证明一个选择培养基具有选择性呢？ 应该设置基础培养基（如牛肉膏蛋白胨培养基）或完全培养基作为对照，若基础培养基或完全培养基中生长的菌落数菌多于该选择培养基，则该选择培养基具有选择性； 根据微生物对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。 筛选原则： 耐寒微生物 石油分解菌 被石油污染的土壤 冰川冻土层 实验室筛选微生物原理： 人为提供_______________的条件（包括_____、_____和_____等），同时_______________________ 有利于目的菌生长 抑制或阻止其他微生物的生长 营养 温度 pH 6.1 细胞的增殖-课件【新教材】人教版（2019）高中生物必修一(共42张PPT) 一、选择培养基 概念： 在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基称为选择培养基。 一、选择培养基 类型 条件 分离得到的菌种 （1）改变培养条件 （2）添加某种化学物质 （3）营养缺陷 70～80℃的高温 水生栖热菌 类型 加入青霉素 酵母菌、霉菌等真菌 高浓度食盐 金黄色葡萄球菌 不加碳源 不加氮源 自养型微生物 固氮菌 拓展：1、选择培养基配制的三种方法 （1）利用营养缺陷进行选择培养 *营养缺陷的微生物不能正常生长 （2）利用添加某种化学物质进行选择培养 *添加杀伤性物质，有抗性的可以生长，无抗性的死亡 （3）利用改变培养条件进行选择培养 *调节温度、pH等生长条件，只有适应的可以生长 2.实例 （1）目的：分离酵母菌、霉菌等真菌，防止细菌生长 原理：青霉素能抑制细菌生长，对真菌无作用 配制：使用 __________的培养基 （2）目的：分离固氮菌 原理：固氮微生物能利用空气中的氮气 配制：使用 ___________________的培养基 （3）目的：分离自养型微生物 原理：自养型微生物能利用无机碳源 配制：使用_ ______________________的培养基 （4）目的：分离耐酸菌 原理：耐酸菌能在pH为酸性的条件下生长 配制：使用 ___________的培养基 加入青霉素 不加氮源（以N2为氮源） 不加有机碳源（以CO2为碳源） 将pH调至酸性 思考-讨论 尿素的立体结构 尿素［CO(NH2)2］含氮量高，化学性质稳定，是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素被土壤中某些细菌分解成NH3,再被转化为NO3-、NH4+等被植物吸收。 这些细菌之所以能分解尿素，是因为能合成脲酶，来催化尿素分解。 讨论： 1、你如何设计培养基配方，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来？ 培养基添加尿素作唯一氮源，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素、缺乏氮源而不能生长发育繁殖，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。 那么如果让你分离土壤中分解尿素的细菌，你应该怎么设计呢？ 牛肉膏 5.0g 蛋白胨 10.0g NaCl 5.0g 琼脂 20.0g 蒸馏水 定容到1000ml KH2PO4 1.4g NaH2PO4 2.1g MgSO4·7H2O 0.2g 葡萄糖 10.0g 尿素CO(NH2)2 1.0g 琼脂 15.0g 蒸馏水 定容到1000ml 配方一：培养细菌