模型35 现代生物科技-【大鹏生物】2023年高考生物解题模型

154 模型 35 现代生物科技 1.基因工程 【1】GDNF 是一种神经营养因子，对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含 GDNF 基因的表达载体（如图 1 所示），并导入到大鼠神经干细胞中，用于干细胞基因治疗的研究。请回答： （1）在分离和培养大鼠神经干细胞的过程中，使用胰蛋白酶的目的是_________________________。 （2）构建含 GDNF 基因的表达载体时，需选择图 1 中的 __________限制酶进行酶切。 （3）经酶切后的载体和 GDNF 基因进行连接，连接产物经筛选得到的载体主要有 3 种：单个载体自连、 GDNF 基因与载体正向连接、GDNF 基因与载体反向连接（如图 1 所示）。为鉴定这 3 种连接方式，选 择 HpaⅠ酶和 BamHⅠ酶对筛选得到的载体进行双酶切，并对酶切后的 DNA 片段进行电泳分析，结果如 图 2 所示。图中第___________泳道显示所鉴定的载体是正向连接的。 （4）将正向连接的表达载体导入神经干细胞后，为了检测 GDNF 基因是否成功表达，可用相应的 ___________与提取的蛋白质杂交。当培养的神经干细胞达到一定密度时，需进行___________培养以 得到更多数量的细胞，用于神经干细胞移植治疗实验。 【2】表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图 1、图 2 中标注了相关限制酶的酶切位点，其中切割 位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题： （1）用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用________________两种限制酶切割，酶切后的载体 和目的基因片段通过___________酶作用后获得重组质粒，理由是_____________________________。为 了扩增重组质粒，需将其转入处于_______态的大肠杆菌，原核细胞作为受体细胞的优势是______。 （2）为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加_________，平板上长出的菌 落，常用 PCR 鉴定，所用的引物组成为图 2 中__________________。 （3）若 BamH I 酶切的 DNA 末端与 Bcl I 酶切的 DNA 末端连接，连接部位的 6 个碱基对序列为 155 ____________________________，对于该部位，这两种酶________（填“都能”、“都不能”或“只有一 种能”）切开。 （4）若用 Sau3A I 切图 1 质粒最多可能获得____种大小不同的 DNA 片段。 2.细胞工程 【1】通过细胞工程技术，利用甲、乙两种高等植物的各自优势，培育具有抗病、耐盐优良性状的杂种 植株，请回答下列问题： （1）A 处理目前最常用的方法是_______________；PEG 诱导形成 B 的原理是______________；将甲、 乙原生原生体放在等渗溶液中其形态为_________；B 是否再生出细胞壁，检测方法是_________。 （2）幼苗 C 具有的优良性状是________________，由 C 得到目的植株的选择根本上改变了该植物群体 的_______________。 （3）若甲的基因型 yyRr，乙的基因型 MMNn，取甲乙的花粉进行融合，融合的细胞类型________种， 其中 yRMn 的育性是___________（可育/不可育）。 【2】如图所示为植株繁殖的四种人工方式示意图，请据图回答： （1）图中单倍体植株通常的获取方式是____________，若图中单倍体细胞含 2 个染色体组，A 有 4 个 染色体组，则③过程所用化学试剂的作用是____________________。 （2）若想在 C 过程中获得突变体，进而培育成新品种植株，应用物理诱变或化学诱变的方法处理 ____________________。 （3）若要获得水稻的“人工种子”，则应选用图中的____________结构，该结构与正常受精卵形成的 ______有类似的结构和发育过程。 （4）若 D 为胡萝卜—羊角芹，②过程最常用的诱导剂是_________，融合依据的原理是___________， 在融合细胞的培养过程中，培养基的成分通常包括琼脂、无机营养、有机营养和_____________等。 【3】在单克隆抗体制备过程中，筛选出杂交瘤细胞是关键步骤之一。已知细胞合成 DNA 有 D 和 S 两 条途径，其中 D 途径能被氨基嘌呤阻断。人 B 淋巴细胞中有这两种合成途径，但一般不分裂增殖。鼠 骨髓瘤细胞中尽管没有 S 途径，但能不断分裂增殖。将这两种细胞在培养皿中混合，加促融剂促进细 156 胞融合，