2.22 动物细胞工程 - 动物细胞融合技术与单克隆抗体（第2课时）-【精准备课】2022-2023学年高二生物同步教学精品课件（人教版2019选择性必修3）

第2节 动物细胞工程 第2课时 动物细胞融合技术与单克隆抗体 运用植物体细胞杂交技术，可以打破生殖隔离，培育出新的作物类型。那么，能不能让不同种动物体细胞杂交，培育出集不同细胞优势于一身的动物细胞呢？ 动物细胞融合技术 1.突破有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能，在种间、属间、科间，甚至动物与植物间的细胞融合已获成功。如：鼠-鸡、鼠-兔、鼠-猴、人-鼠、人-兔、人-鸡、人-蛙、酵母菌-鸡、人-胡萝卜等。 2.成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。 3.利用动物细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术，为制造单克隆抗体开辟新途径。 指用自然或人工方法使两个或多个不同的动物 细胞融合成一个细胞的过程的技术。 一、动物细胞融合技术 细胞杂交： 杂交细胞： 什么是动物细胞融合技术？ 知识延伸： 不同基因型的细胞之间的融合就是细胞杂交。 融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞成为杂交细胞。 生物法：灭活病毒诱导法 病毒颗粒黏 附细胞表面 细胞膜连接 细胞膜被 病毒颗粒穿通 细胞融合、形成杂种细胞 诱导动物细胞融合的方法有哪些？ 化学法：PEG（聚乙二醇）融合法 物理法：电融合法、离心 病毒有： 仙台病毒、疱疹病毒、新城鸡瘟病毒 仙台病毒——应用最为广泛。 这是由于病毒的磷脂外衣与动物细胞的膜十分相似。病毒外壳上的某些糖蛋白可能还有促进细胞融合的功能。 为什么细胞融合过程中使用的病毒需要灭活？ 不灭活的病毒会感染细胞。灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏它们的抗原结构。 病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质和脂质重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 灭活病毒诱导细胞融合的原理是什么？ 植物体细胞杂交、动物细胞融合的比较 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 原理 细胞融合的方法 诱导方法 用途 细胞膜的流动性 植物细胞全能性 去除细胞壁后诱导原生质体融合 物理（离心、振荡、电刺激） 化学（PEG） 获得杂种植株 物理、化学方法（同左） 生物：灭活的病毒 使细胞分散后诱导细胞融合 细胞膜的流动性 主要用于制备 单克隆抗体 二、单克隆抗体的制备 什么是抗体？怎么产生的？主要分布在哪？ 概念： 抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 产生： B细胞受抗原刺激后，增殖分化为浆细胞，浆细胞合成并分泌抗体。 分布： 抗体主要分布于血清中,也分布于组织液及外分泌液中 传统制备抗体的方法是什么？存在什么问题？ 抗体的传统生产方法 从血清中分离抗体 该法制备抗体的特点： 产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。 多种浆细胞 动物体内 多种抗体 抗原 为什么传统制备的抗体产量低、纯度低？如何制备产量高、纯度高的抗体？ 由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 单克隆抗体 人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，动物体内的B淋巴细胞可以产生百万种以上的抗体，每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。但是每一个B淋巴细胞只能产生一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。 如何大量制备单克隆抗体？可行的设计方案是怎样的？ 不可行。因为在体外培养的条件下，一个B淋巴细胞不可能无限增殖。 肿瘤细胞 提示1：对经过免疫的B细胞进行细胞培养可行吗？ 提示2：我们学过的什么细胞可以无限增殖？ 提示3：有什么办法能使B淋巴细胞既能产生抗体，又同时具有肿瘤细胞无限增殖的能力？ 利用动物细胞融合技术将两种细胞融合获得同时具有淋巴细胞和肿瘤细胞特性的细胞，即：杂交瘤细胞。 再利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞。 设计方案 单克隆抗体制备过程是怎样的？ 写出单克隆抗体制备的流程图 思考： 1.本过程利用了哪些原理？ 免疫原理，动物细胞融合原理和动物细胞培养原理 2.注射抗原的目的是什么？ 3.为什么选择骨髓瘤细胞？ 骨髓瘤细胞是B淋巴细胞突变形成的肿瘤细胞，在可以无限地增殖同时，失去了分泌抗体的能力，但它仍保留了许多B淋巴细胞的特性。营养缺陷型的骨髓瘤细胞丧失了一些生长必需物质的合成能力。因此在缺少这些必需营养成分的选择培养液中，营养缺陷型的骨髓瘤细胞就会停止生长。 诱导产生能产生抗体的浆（B）细胞 5.为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？ 这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅具有B细胞分泌抗体的能力，而且还有无限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体。 4.诱导细胞融合的手段有哪些？ 7.融合处理后的细胞是否可以直接用于培养，为什么