内容正文:
10.3 动物细胞工程
动物细胞培养技术
动物细胞融合与单克隆抗体
动物细胞核移植技术
阐明动物细胞培养是从动物体获得相关组织,分散成单个细胞后,在适宜的培养条件下让细胞生长和增殖的过程。动物细胞培养是动物细胞工程的基础;
阐明动物细胞核移植一般是将体细胞核移入一个去核的卵母细胞中,并使重组细胞发育成新胚胎,继而发育成动物个体的过程
阐明动物细胞融合是指通过物理、化学或生物学等手段,使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程
概述细胞融合技术是单克隆抗体制备的重要技术
【课标要求】
1、概念:从动物体中取出相关的组织,将它分散成 ,然后在适宜的培养条件下,让这些细胞 的技术。
单个细胞
生长和增殖
考点一:动物细胞培养
2、原理:
细胞增殖
3、条件:
①营养:
营养物质:糖类、氨基酸、无机盐、维生素
:补充培养液中尚未研究清楚的成分
血清
②无菌、无毒的环境:
培养液和所有 培养用具 灭菌处理,无菌环境下操作
定期更换培养液,以便清除代谢物
③温度、
和渗透压
哺乳动物细胞培养的温度多以 ℃为宜,多数动物细胞生存的适宜pH为 ,此外渗透压也是动物细胞培养过程中需要考虑的一个重要环境参数。④
气体环境:95%空气+ (维持培养液的pH)。
36.5±0.5
7.2~7.4
5%CO2
[提醒] 动物细胞培养一般用液体培养基,植物组织培养一般用固体培养基。
传代培养
取动物组织
制成细胞悬液
原代培养
放入CO2培养箱中培养
放入CO2培养箱中培养
用机械的方法,或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理的方法,将组织分散成单个细胞
4.动物细胞培养的过程
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辨析动物细胞培养相关的两组概念
1)细胞贴壁与接触抑制①细胞贴壁:悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。②接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为接触抑制。
2)原代培养与传代培养①原代培养:动物组织经处理后的初次培养称为原代培养。原代培养的细胞核型一般正常。②传代培养:悬浮培养的细胞直接用离心法收集;贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理,然后分瓶继续培养,让细胞继续增殖。这样的培养过程通常被称为传代培养。
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[提醒] ①区分原代培养和传代培养的关键是看用胰蛋白酶处理的对象和是否分瓶。
②分瓶前,第一次用胰蛋白酶对动物组织进行处理后的培养是原代培养。
③第二次用胰蛋白酶处理,使细胞从瓶壁上脱离下来,分瓶后的细胞培养为传代培养。
《新坐标》
胚胎干细胞
(1)概念:干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞,与组织、器官的发育、再生和修复密切相关。
(2)来源:早期胚胎、______和脐带血等。
骨髓
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诱导多能干细胞(iPS细胞)
(1)制备肝细胞悬液时先用剪刀剪碎肝组织,再用胃蛋白酶处理。( )
(2)肝细胞培养过程中通常在培养液中通入5%的CO2刺激细胞呼吸。( )
(3)动物细胞培养要定期更换培养液,其目的是清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。( )
(4)培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞。( )
(5)动物细胞培养技术的原理是动物细胞的全能性。( )
(6)一般认为,成体干细胞具有发育成完整个体的能力。( )
×
√
×
×
×
×
提示:一般认为,成体干细胞具有组织特异性,只能分化成特定的细胞或组织。
1.(选择性必修3 P44正文)“在使用合成培养基时,通常需要加入血清等一些天然成分。”血清中含有哪些促进细胞代谢和生长的物质?__________________________________________。
蛋白质、氨基酸、未知的促生长因子等
2.(选择性必修3 P45图2-12改编)用胰蛋白酶处理动物组织,对细胞的消化有两种情况:
(1)短时间内细胞________(填“会”或“不会”)被消化,原因是_________________________________________________________________。
(2)长时间后细胞________(填“会”或“不会”)被消化,原因是_________________________________________________________________
__________________________________。
不会
细胞表面具有糖蛋白,对细胞具有一定的保护作用
会
细胞表面糖蛋白的保护作用是有限的;细胞膜的主要成分包括磷脂和蛋白质,蛋白质可被胰蛋白酶水解
考点二:动物细胞融合技术和单克隆抗体的应用
灭活病毒
细