内容正文:
第2节 微生物的培养技术及应用(第3课时)
【学习目标】
1.概述培养基的配制方法和微生物纯培养的基本操作要求,进行酵母菌的纯培养。
2.阐明微生物选择培养的原理。
3.进行土壤中分解尿素的细菌的分离和计数。
【知识梳理】
1.选择培养基
(1)概念:允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。
(2)举例:筛选土壤中分解尿素的细菌的选择培养基是以尿素为唯一氮源,按物理性质归类为固体培养基。
2.微生物的选择培养——稀释涂布平板法
(1)系列稀释操作
①编号为1×102~1×107试管中分别盛有9 mL无菌水。
②将10 g土样加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中,充分摇匀。
③取1 mL上清液加入盛有9 mL无菌水的试管中,依次等比稀释。
(2)涂布平板操作
取菌液:取0.1 mL菌液,滴加到培养基表面
↓
涂布器消毒:将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中
↓
涂布器灭菌:将涂布器放在火焰上灼烧,待酒精燃尽、涂布器冷却后,再进行涂布
↓
涂布平板:用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿,使涂布均匀
3. 两种接种方法的比较
项目
平板划线法
稀释涂布平板法
用途
一般用于菌种的纯化
一般用于筛选菌株
优点
可对混合菌进行分离
可以计数
缺点
不能计数
操作复杂,若平板不干燥,则效果不好;若菌液浓度大,则长不出单菌落
培养结果
【课后训练】
一、单选题
1.图示为分离以尿素为氮源的微生物实验的其中一个培养皿上的实验结果。培养基中加了酚红,图中的阴影部分实际为红色。下列对结果的分析正确的是( )
A.菌落A能产生分解尿素的脲酶 B.菌落C利用尿素的能力大于菌落B
C.尿素为微生物提供了碳源和氮源 D.尿素分解产生NH3都排出细胞
2.某生物学兴趣小组尝试对土壤中分解尿素的细菌进行分离并计数,相关叙述正确的是( )
A.制备选择培养基时,需加入尿素、琼脂、葡萄糖、硝酸盐等物质
B.用稀释涂布平板法统计结果,活菌的实际数目往往比统计的菌落数低
C.脲酶将尿素分解成氨使培养基的pH降低,加入酚红指示剂后变红
D.每毫升菌液中微生物细胞的数量=某一稀释倍数下至少3个培养皿的平均菌落数÷菌液稀释液体积×稀释倍数
3.下列关于微生物的培养与应用的叙述正确的是( )
A.用涂布分离法分离细菌时,需要用接种环将菌液涂布到培养基平面上
B.在尿素固体培养基上,产脲酶细菌菌落周围会出现白色的透明环带
C.利用醋酸菌将果酒发酵成果醋,需要不断向发酵装置中通入无菌空气
D.利用微生物进行发酵制成的泡菜美味可口,含有的成分对人体均有益
4.下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是( )
A.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4.7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水
B.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4.7H2O、葡萄糖、琼脂、水
C.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4.7H2O、尿素、琼脂、水
D.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4.7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水
5.如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验示意图。据图分析下列叙述正确的是( )
A.3号试管中样品的稀释倍数为103倍
B.用4号试管中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数约为5号试管的10倍
C.5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×108个
D.该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要高
6.下列关于微生物选择培养的叙述,错误的是( )
A.选择培养的目的是提高样品中目的微生物的含量
B.选择培养前要对样品进行稀释
C.选择培养时保持振荡,可以让微生物与营养物质充分接触,快速生长繁殖
D.当培养液变混浊时,要更换新鲜的培养液
7.下图所示为分离某种以尿素为氮源的细菌实验过程,下列叙述错误的是( )
A.土样从有哺乳动物尿液的地方取,获得目的菌种几率很高
B.为验证尿素固体培养基具有选择作用,可用牛肉膏蛋白胨固体培养基做对照
C.将实验组和对照组37℃恒温培养24至48h时,需将平板倒置
D.在尿素固体培养基上生长的细菌都是以尿素为氮源的细菌
8.分离土壤中分解尿素的细菌,对培养基的要求是( )
①加尿素 ②不加尿素 ③加琼脂 ④不加琼脂
⑤加葡萄糖 ⑥不加葡萄糖 ⑦加硝酸盐 ⑧不加硝酸盐
A.①③⑤⑦ B.②④⑥⑧ C.①③⑤⑧ D.①④⑥⑦
9.下图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的过