1.2 微生物的培养技术及应用（第4课时）（知识梳理+课后训练）-2022-2023学年高二生物同步精品课堂（人教版2019选择性必修3）

第2节　微生物的培养技术及应用（第4课时） 【学习目标】 1.概述培养基的配制方法和微生物纯培养的基本操作要求，进行酵母菌的纯培养。 2.阐明微生物选择培养的原理。 3.进行土壤中分解尿素的细菌的分离和计数。 【知识梳理】 1．统计菌落数目 方法：稀释涂布平板法和显微镜直接计数法。常用来统计活菌数目的方法是稀释涂布平板法。 2．稀释涂布平板法 (1)统计依据：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 (2)操作 ①同一稀释度下，应至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值。 ②为保证结果准确，一般选择菌落数为30～300的平板进行计数。 ③统计的菌落数往往比活菌实际数目低。 3．显微镜直接计数法：利用特定的细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下观察、计数，然后再计算一定体积的样品中微生物的数量，缺点是不能区分死菌与活菌。 4．土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 Ⅰ.实验设计 (1)土壤取样 ①土壤要求：酸碱度接近中性且潮湿。 ②取样部位：距地表约3～8_cm的土壤层。 (2)样品的稀释 测定土壤中细菌的数量，一般选用1×104、1×105和1×106倍稀释的稀释液进行平板培养，当第一次做这个实验时可以将稀释的范围放宽一点。 (3)微生物的培养与观察 ①培养：根据不同微生物的需要，控制适宜的培养温度和培养时间。细菌一般在30～37 ℃的温度下培养1～2 d。 ②观察 a．观察方法：每隔24 h统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果。 b．记录菌落的特征：包括菌落的形状、大小和颜色等。 Ⅱ.操作提示 (1)无菌操作 ①取土样的用具在使用前都需要灭菌。 ②实验操作均应在火焰旁进行。 (2)做好标记：本实验使用的平板和试管比较多，为避免混淆，最好在使用前做好标记。例如，在标记培养皿时应该注明组别、培养日期和平板上培养样品的稀释度等。 (3)制定计划：对于耗时较长的生物实验，需要事先规划时间，以便提高实验效率，在操作时有条不紊。 【课后训练】 一、单选题 1．从土壤中筛选纤维素分解菌的实验设计，正确的是（    ） A．土壤取样→梯度稀释→稀释涂布平板→挑选菌落 B．土壤取样→选择培养→稀释涂布平板→挑选菌落 C．土壤取样→梯度稀释→选择培养→挑选菌落 D．土壤取样→梯度稀释→稀释涂布平板→选择培养→挑选菌落 2．纤维素酶的测定方法一般是（    ） A．对纤维素进行定量测定 B．对纤维素分解菌进行定量测定 C．对纤维素酶分解纤维素后所产生的纤维二糖进行定量测定 D．对纤维素酶分解纤维素后所产生的葡萄糖进行定量测定 3．下列关于微生物选择培养的叙述，错误的是（    ） A．选择培养的目的是提高样品中目的微生物的含量 B．选择培养前要对样品进行稀释 C．选择培养时保持振荡，可以让微生物与营养物质充分接触，快速生长繁殖 D．当培养液变混浊时，要更换新鲜的培养液 4．平板划线法和稀释涂布平板法是常用的两种接种方法。下列相关叙述错误的是（    ） A．两种方法都能获得由单个细胞繁殖而成的单菌落 B．通过稀释涂布平板法统计的活菌数一般低于实际的活菌数 C．接种环在第一次划线前和最后一次划线后都需要灼烧灭菌，其余过程不需要 D．稀释涂布平板法既可以分离纯化微生物，也可以用于微生物的计数 5．如图为分离和纯化分解甲醛的细菌的实验过程，其中LB培养基能使菌种成倍扩增，以下说法正确的是（    ） A．需要对活性污泥作灭菌处理 B．②中LB培养基只能以甲醛为唯一碳源 C．目的菌种异化作用类型为厌氧型 D．经⑤处理后，应选择瓶中甲醛浓度最低的一组进一步纯化培养 6．稀释涂布平板法不仅是分离和纯化微生物的重要方法，也是测定微生物数量的重要方法。用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在统计数据时应（    ） A．随机抽取某个稀释度的培养基，统计菌落数 B．将不同稀释度的3个培养基上的菌落数求和 C．将相同稀释度的全部培养基上的菌落进行计数 D．随机抽取相同稀释度的3个培养基统计菌落数后求平均值 7．在“果醋制作过程”中，获得较多的醋酸杆菌菌种的最简便方法是（　　） A．不必人为加入菌种，在葡萄等水果表面本身就存在大量醋酸杆菌 B．从变酸的葡萄酒表面获得菌膜，再培养、分离 C．从泡菜坛盖边沿的水槽中的表面获得菌膜，再培养、分离 D．从土壤中分离提取 8．关于统计样品中活菌数目的叙述错误的是（    ） A．样品的稀释度将直接影响平板上的菌落数目，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养 B．在同一稀释度下，应至少对三个菌落数为30到300的平板进行重复计数，然后求出平均值 C．统计的菌落数往往比活菌的实际数目多 D．可以用细菌计数板或血细胞计数