内容正文:
基因工程
第3章
章末综合提升
主干知识·体系构建
重点难点·全维梳理
目
录
Contents
主干知识·体系构建
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生物学 选择性必修3
重点难点·全维梳理
重难点1 界定启动子与起始密码子、终止子与终止密码子
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重难点2 限制酶的选择原则与方法
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重难点3 PCR技术获取目的基因时至少经过3轮循环才能从DNA分子中分离出目的基因的原因
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重难点4 界定克隆动物、试管动物与转基因动物
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生物学 选择性必修3
制 作 者:状元桥
适用对象:高中学生
制作软件:Powerpoint2003、
Photoshop cs3
运行环境:WindowsXP以上操作系统
启动子与起始密码子、终止子与终止密码子比较如下:
项目
启动子
终止子
起始密码子
终止密码子
化学
成分
DNA片段
DNA片段
mRNA上三个相邻碱基
mRNA上三个相邻碱基
位置
目的基因首端(上游)
目的基因尾端(下游)
mRNA首端
mRNA尾端
项目
启动子
终止子
起始密码子
终止密码子
作用
RNA聚合酶识别和结合的部位,驱动基因转录出mRNA
决定转录的结束
翻译的起始信号
决定翻译过程的结束
【对点训练1】关于启动子、终止子及密码子的叙述,正确的是( )
A.启动子和终止子位于DNA上,分别决定DNA的复制的启动与终止
B.起始密码子和终止密码子位于mRNA上,分别决定翻译的启动与终止
C.起始密码子和终止密码子分别转录自启动子和终止子
D.mRNA上有多少种密码子,tRNA上就有多少种反密码子
答案 B
解析 启动子、终止子均位于DNA上,调控基因的转录过程,A项错误;在基因表达过程中,起始密码子和终止密码子位于mRNA上,调控基因的翻译过程,B项正确;起始密码子和终止密码子都转录自基因的编码区,而启动子和终止子都位于基因的非编码区,C项错误;终止密码子一般不对应反密码子,D项错误。
1.限制酶的选择原则
根据目的基因两端的限制酶切割位点、质粒上的限制酶切割位点及是否破坏目的基因和标记基因等来确定限制酶的种类——原则上必须使目的基因两端与运载体切口两端出现能“互补”的“末端”。
2.选择方法
INCLUDEPICTURE"22CSWXB3-296.TIF"
(1)应选择切割位点位于目的基因两端的限制酶,如图甲可选择Pst Ⅰ;不能选择切割位点位于目的基因内部的限制酶,如图甲不能选择Sma Ⅰ。
(2)为避免目的基因和质粒的自身环化及目的基因与质粒的反向连接,可使用两种切割后能产生不同黏性末端的限制酶切割目的基因所在片段和质粒(双酶切),如图甲可选择用Pst Ⅰ和EcoR Ⅰ两种限制酶(但要确保质粒上也有这两种限制酶的切割位点),确保目的基因和载体质粒正向连接。
(3)切割质粒的限制酶不能同时切开质粒上的所有标记基因,即至少要保留一个标记基因,以用于重组DNA的鉴定和选择,如图乙中的质粒不能使用Sma Ⅰ切割。
【对点训练21】若要利用某目的基因(见图甲)和质粒载体(见图乙)构建重组DNA(见图丙),限制性内切核酸酶的酶切位点分别是Bgl Ⅱ (5′—A↓GATCT—3′)、EcoRⅠ(5′-G↓AATTC—3′)和Sau3A Ⅰ(5′—↓GATC—3′)。下列分析合理的是( )
INCLUDEPICTURE"22CSWXB3-298.TIF"
答案 D
A.用EcoR Ⅰ切割目的基因和质粒载体
B.